103476-89-7在实验中的作用,亮抑酶肽在医药领域优势有哪些呢?
关键词:亮抑酶肽;103476-89-7;Leupeptin;药物多肽;多肽定制合成
在生命科学的实验室里,组织与细胞裂解常伴随一个棘手问题——钙依赖蛋白酶、丝氨酸蛋白酶与巯基蛋白酶在细胞破裂瞬间被释放,迅速降解研究者珍视的靶蛋白。亮抑酶肽正是为此而生的“微型锁”:它以纳摩尔级亲和力可逆地占据这些蛋白酶的活性中心,让样品保持“原汁原味”。
一、作用机制:竞争性“占位”,温和可逆
亮抑酶肽(103476-89-7)的化学骨架为Ac-Leu-Leu-argininal,C-端醛基与靶酶活性位点的丝氨酸/半胱氨酸形成可逆共价加合物,从而阻断底物进入。其抑制谱覆盖:
丝氨酸蛋白酶:胰蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶
巯基蛋白酶:木瓜蛋白酶、钙蛋白酶、组织蛋白酶 B/H/L
对胃蛋白酶、组织蛋白酶D、α-糜蛋白酶、凝血酶无显著抑制,可在同一样本中“精准屏蔽”特定酶类。
二、实验应用:从Western blot到动物模型
1.蛋白提取:在裂解缓冲液中加入10–100μM亮抑酶肽,可显著减少靶蛋白降解条带,提高Western blot定量准确性。
2.钙蛋白酶研究:心肌缺血再灌注模型中,0.5 mg kg⁻¹腹腔注射即可抑制钙蛋白酶过度活化,减少心肌细胞凋亡与肌钙蛋白I裂解。
3.自噬与神经保护:通过抑制溶酶体组织蛋白酶,阻断LC3-II降解,可在小鼠肝脏中“人为堆积”自噬体,用于评估自噬通量。
4.抗病毒新视角:体外实验显示,亮抑酶肽对SARS-CoV-2主要蛋白酶(Mpro)IC₅₀约127μM,虽属中等强度,却为老药新用提供思路。
三、使用要点:小体积、短时间、低温操作
溶解性与稳定性:易溶于水(50mg mL⁻¹),10mM储存液可于-20°C避光保存6个月;工作液(10–100μM)仅数小时稳定,需现配现用并置于冰上。
去除方法:通过透析或凝胶过滤即可完全移除,不影响后续酶学分析或质谱检测。
安全窗口:对细胞毒性极低,100μM以下浓度未见显著生长抑制,可放心用于原代细胞与类器官培养。
四、小结
亮抑酶肽(103476-89-7)以“可逆、竞争、广谱”三大特性,成为蛋白研究中的“常规军”。从试管中的Western blot,到体内的神经保护与心肌缺血研究,它用一把微型锁,为科学家守住蛋白的完整,也为细胞争取更多生机。
基本信息
中文名:亮抑酶肽
英文名:Leupeptin
别名:Acetyl-Leu-Leu-Arg-CHO
CAS.:103476-89-7
产品编号:GT-P2758
产地:Go Top peptide(杭州固拓)
外观:白色或类白色粉末
储存条件:Store at -20°C
纯度:≥98% (HPLC)
序列:Ac-Leu-Leu-Arg-CHO.1/2H2SO4.H2O
分子式:C20H38N6O4.1/2H2SO4.H2O
分子量:493.61
申明:产品仅供科研使用,不得用于人体。
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