DSPE-TK-PEG-FA 并非天然存在的化合物，而是通过多步有机合成将四种功能模块精准耦合而成的定制化分子。其构建过程体现了现代药物化学中“模块化设计”理念。首先，以 DSPE 为起始原料，其氨基端通过酰胺化或氨基甲酸酯化反应连接至 TK 连接子的一端。TK 单元通常采用 2,2′-二硫代二丙酸或类似含硫缩酮结构的小分子，其核心特征是在两个碳原子间引入硫醚键，形成对活性氧敏感的断裂位点。随后，TK 的另一端与单甲氧基聚乙二醇（mPEG）的羧基端发生偶联，生成 DSPE-TK-PEG 中间体。最后，将叶酸（FA）通过 NHS/EDC 等活化方法共价连接至 PEG 的末端羟基上，形成完整的 DSPE-TK-PEG-FA 分子。
这一构建过程的关键在于化学选择性与反应条件控制。例如，FA 含有多个羧基和氨基，需保护特定官能团以避免副反应；PEG 链长（如 MW=2000 或 5000 Da）的选择直接影响载体的水动力学尺寸和体内分布；而 TK 的引入位置必须确保其在纳米颗粒组装后仍能有效响应 ROS。最终产物可通过薄膜分散法、微流控技术或乙醇注入法整合进脂质体或聚合物胶束中。在自组装过程中，DSPE 的疏水尾部嵌入脂质核心，PEG-FA 伸展至水相形成冠层，TK 则位于 DSPE 与 PEG 之间的“铰链区”，静待氧化信号触发解离。这种精巧的层级组装不仅赋予材料结构稳定性，更实现了时空可控的药物释放，是纳米医学工程中分子设计与功能集成的典范。