酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种基于抗原-抗体特异性结合的免疫学检测技术，其信号强度与待测物浓度成正比。然而，传统ELISA受限于信号弱、背景干扰等问题，难以检测极低浓度的目标分子。因此，引入信号放大技术成为提升其性能的关键途径。这些技术通过增加可检测信号的数量或强度，有效降低了检测限，提高了实验的灵敏度和可靠性。
ELISA信号放大技术通过酶催化反应和生物分子相互作用提升检测灵敏度，主要应用包括以下方面：
一、酶促放大技术
HRP/ALP酶系统：辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）催化底物（如TMB）显色，信号强度可提升10-100倍。
酪胺信号放大（TSA）：通过酪胺化反应共价结合富电子蛋白，使检测限从皮克级（10^-12）降至飞克级（10^-15）。
二、生物素-亲和素系统（BAS）
多级放大：亲和素可结合4个生物素分子，通过链霉亲和素-酶复合物（如SA-HRP）实现信号指数级放大。
应用场景：
夹心ELISA：双抗体夹心结合BAS，灵敏度达pg/mL级。
化学发光免疫分析（CLIA）：吖啶酯标记结合BAS，发光信号增强4倍。
三、超敏ELISA技术
TSA超敏试剂盒：通过生物素化酪胺（B-T）和链霉亲和素-HRP（SA-HRP）两步放大，检测飞克级细胞因子（如IL-6）。
磁珠固相载体：结合BAS和磁珠分离技术，减少非特异性干扰。
四、其他衍生技术
CRISPR-Cas13a辅助放大：通过核酸酶切割靶标RNA，实现信号级联放大。
等离子体信号放大：利用金属纳米颗粒表面等离子体共振效应增强荧光信号。
这些技术通过特异性结合与信号放大协同作用，显著提升了ELISA在临床诊断和科研中的检测性能。