Western blot 或蛋白质免疫印迹是一种常规蛋白分析技术。抗体-抗原相互作用的特异性实现了复杂蛋白质混合物中的靶蛋白识别。在这里，您可以获取常用的裂解液配方、常用试剂制备方法、western blot 电泳相关试剂、封闭液与凝胶配方和转膜相关缓冲液的详细配方，帮助您顺利完成实验。除此之外，EnkiLife（恩玑生命）提供快速高效的全流程WB试剂盒，即开即用，免去复杂配液烦恼，打开文末链接即刻体验。
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一、常用裂解液配方
1. 细胞骨架结合蛋白提取缓冲液--用于提取细胞骨架结合蛋白
2. 可溶性蛋白缓冲液--用于提取可溶性蛋白
3. RIPA裂解液--适用于核膜破碎提取核蛋白
（Trips:含离子型去垢剂脱氧胆酸钠，适用于核膜破碎提取核蛋白。可能使激酶变性并破坏蛋白互作。）
4. NP-40裂解液--温和裂解液配方
二、常用试剂制备方法
1. 100 mM EDTA母液
2. 10×TBS浓缩液
3. TBST工作液（1L）--洗涤缓冲液
4. 磷酸酶抑制剂母液--防止蛋白去磷酸化
（Trips:通风橱下完成，煮沸时加盖防蒸发，溶液变黄则废弃，常见使用浓度范围为 1-10 mM。）
5. 温和剥离缓冲液（1L）--膜再生缓冲液
6. 强效剥离缓冲液（100ml）
（Trips:需通风橱内操作。）
7. 抗体稀释液--用于稀释一抗或二抗
8. 碳酸盐包被缓冲液（100 mM, pH 9.6）--用于ELISA实验的包被缓冲液
9. PBS（pH 7.4, 500ml）
10. 1 M Tris-HCl，pH 7.6
11.0.5 M Tris-HCl，pH 6.8
12. 10% SDS
13. 1%溴酚蓝--电泳指示剂
四、电泳相关试剂
1. SDS上样缓冲液（2X）--用于SDS-PAGE上样
2. LDS上样缓冲液（4X）--用于LDS-PAGE上样
3. Tris-甘氨酸SDS电泳缓冲液（10X）--SDS-PAGE电泳缓冲液
4. Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液（10X）--非变性PAGE电泳缓冲液
5. MOPS SDS电泳缓冲液（20X）--MOPS缓冲系统电泳液
6. MES SDS电泳缓冲液（20X）--MES缓冲系统电泳液
7. Tricine SDS电泳缓冲液（10X）--Tricine缓冲系统电泳液
五、封闭液与凝胶配方
1. 5%脱脂奶粉封闭液--Western Blot封闭液
2. 3%BSA封闭液--Western Blot封闭液
3. 分离胶配方
（Trips:TEMED、APS最后加入，并在倒胶之前充分混匀。）
4. 50%丙烯酰胺/Bis--凝胶储存液
5. 分离胶缓冲液
6. 过硫酸铵（APS）（现配）--凝胶聚合引发剂
7. 4%浓缩胶--SDS-PAGE浓缩胶
（Trips:TEMED、APS最后加入，并在倒胶之前充分混匀。）
8. 浓缩胶缓冲液
六、转膜相关缓冲液
1. Tris-甘氨酸转膜缓冲液（25X）--Western转膜缓冲液
2.Bis-Tis转膜缓冲液（20X）--Bis-Tris系统转膜缓冲液
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