装柱那点事儿：手把手教你装出高效层析柱
发布日期:2026/3/25 15:31:37发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司阅读量：48
那位拧开柱管、抓起填料瓶就要倒的同学，先别急！装层析柱可不是 “倒进去就行” 的粗活 —— 填料装得匀不匀，直接决定了后续分离效果好不好。这活儿精细又讲究，跟着我们一步步来，新手也能装出满意的高效柱～
一、先算再装：精准算好填料用量
装柱第一步，得先算准需要多少填料，避免 “装不够” 或 “装不下” 的尴尬。
核心计算公式
所需填料体积 = 计划柱高 × 柱管底面积 × 压缩因子
计划柱高：你想要的最终柱床高度（可查空柱说明书的最大允许高度）
柱管底面积：圆的面积公式 S = π × (柱管直径/2)²（直径从空柱参数里找）
压缩因子：不同填料受压后会收缩，这个系数看填料说明书就行，比如琼脂糖填料通常在 1.05-1.15 之间
比如 Tricorn 柱的高度调节范围小，算准用量尤其关键，别等倒进去才发现要么差一截，要么溢出来。
二、配好匀浆：打好装柱基础
算好体积后，就该配制装柱用的填料匀浆了，这步要耐心，细节决定成败。
1,取填料：轻柔摇晃填料瓶，让填料和保存液充分混匀，倒进量筒后静置等待沉降 —— 别着急读数，等体积稳定了再记。
2,换缓冲液：把瓶里的保存液换成装柱缓冲液（常用低浓度氯化钠溶液，防止填料挂壁），可以用抽滤或者倒掉上清液的方法置换。
3,调浓度：把填料和缓冲液混成 40%-60% 的匀浆（具体浓度看填料说明书），太稀会导致柱床松散，太稠容易产生气泡。
三、组装验漏：杜绝漏液返工
别小看拼柱子！一个接口没拧紧，装到一半漏液就得从头来过。
组装要点
用过的空柱要彻底清洗，密封圈上不能留残留填料，否则会漏液；
清洗后的部件要擦干再装，水滴会让密封圈变滑，导致内管移位；
柱管、装柱器、接头要逐个拧紧，确保无缝隙。
验漏操作
把组装好的柱子连到层析系统，开工作流速加压，检查所有接口有没有渗漏 —— 确认不漏了，才能进入下一步装柱。
四、装柱实操：流速 + 压力两步走
验漏没问题后，就可以正式装柱了，核心是 “先流速、后压力” 的两步压实法。
1,倒匀浆：倒出柱管内的液体，垂直固定柱管，用玻璃棒引流，一次性把匀浆倒进柱管（别分多次，避免分层），加满液体后拧紧上端口。
2,恒定流速阶段：把柱子连到 ÄKTA 系统，下端通大气，开恒定流速 —— 看着压力慢慢升高，填料会逐渐沉降、压实成柱床。
3,恒定压力阶段：拆去装柱器，把柱子下端接入系统，设定恒定压力 —— 此时流速会慢慢减慢，直到不再变化，说明柱床已经压实稳定了。
五、装好柱头：牢牢固定柱床
柱床不再下降后，用马克笔标记柱床位置，然后根据柱型装柱头：
XK/HiScale 柱：把柱头调节杆转到标记线下 1-2mm，拧紧上端黑色部件，让密封圈充分膨胀，固定柱床；
Tricorn 柱：先放好上端滤膜，拧紧柱头压实滤膜和柱床，再锁上柱头上方的锁扣。
六、测柱效：确认装柱合格
装完得 “验收” 一下，看看柱效达不达标，常用两种简单方法：
| 检测方法 | 样品 | 流动相 | 检测指标 | 电导法
0.8 M NaCl
0.4 M NaCl
电导峰
合格标准
理论塔板高度（HETP）：＜5 倍填料粒径（数值越小，分离效果越好）
不对称因子（As）：0.8-1.5 之间（峰型对称，说明装填均匀）
满足这两个条件，就说明你装出了一根合格的层析柱！
小结
装柱是个 “慢工出细活” 的技术活，光看理论不够，得多练、多关注细节 —— 从算量到验漏，每一步都藏着影响柱效的关键。
作为 Cytiva 授权代理商，优宁维不仅能为你提供全套层析填料和空柱，还能提供装柱操作指南、现场技术支持，帮你少走弯路，高效装出满意的层析柱～
Superose 6 Increase 10/300 GL
EA
Superose 6 Increase 3.2/300
EA
Superose 6 Increase 5/150 GL
EA
相关新闻资讯
查看更多