3-磷酸甘油酯酶(GPP)活性试剂盒微板法/48样
产品简介：
3-磷酸甘油酯酶（GPP，EC3.1.3.21）催化 3-磷酸甘油脱下磷酸根离子形成甘油，是甘油合成过程中的后一步酶促反应，该酶活性的高低直接决定甘油的生成水平。本试剂盒采用 3-磷酸甘为底物，用钼酸铵显色剂测定单位时间内酶催化产生的磷酸根离子的量，进而得出 3-磷酸甘油酯酶的活性大小。
试剂盒组成和配制：
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体60mL×1瓶 | 4°℃保存 |
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试剂一 | 粉剂mg×1瓶 | -20℃保存 | 用前甩几下或离心使粉剂落入底部，临用前加6mL蒸馏水溶解备用。用不完的试剂4℃保存。 |
试剂二 | 液体6mL×1瓶 | 4°℃保存 |
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试剂三 | A:粉体mg×1
B: 液体2mL×1瓶 | 4℃保存 | 临用前在试剂A中加1.8mL的B液，再加23.2mL的蒸馏水，混匀溶解备用。用不完的试剂4℃保存，若试剂变色则舍弃。 |
标准品 | 粉体mg×1支 | 4°℃保存 | 若重新做标曲，则用到该试剂 |
[注]: 全程操作需无磷环境；试剂配置好用新的枪头和玻璃移液器等，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
所需的仪器和用品：
酶标仪、EP 管、96 孔板、可调试移液器、台式离心机、水浴锅、研钵、冰和蒸馏水。
α-磷酸甘油酯酶(GPP)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
样本制备：
①组织样本：
取约0 . 1g 组织(水分充足的样本可取0.5g)到研钵内，加入1mL 提取液，在冰上进 行冰浴匀浆或者液氮研磨。12000rpm,4℃ 离 心 1 0min, 取上清，置冰上待测。
[注]: 也可以按照组织质量 (g): 提取液体积(mL)为1:5~10的比例提取。
②细菌/真菌样本：
先收集细菌/真菌到离心管内，离心后弃上清；取500万细菌/真菌加入1mL 提取液；
冰浴超声波破碎细菌/真菌(冰浴，功率20%或200W, 超 声 3s,间 隔 1 0s,重 复 3 0 次 ) ; 12000rpm,4℃ 离 心 1 0min, 取上清，置冰上待测。
[注]: 也可按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL) 为500~1000:1的比例进行提取。
③液体样本：澄清的液体样本直接检测，若浑浊则离心后取上清液检测。
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