顺乌头酸酶(ACO)测定试剂盒/分光光度法/48样 新品

顺乌头酸酶(ACO)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

顺乌头酸酶（aconitase），三羧酸循环中的酶，催化柠檬酸转变为异柠檬酸。柠檬酸本身不易氧化，在顺乌头酸酶作用下，通过脱水与加水反应，使羟基由β碳原子转移到α碳原子上，生成易于脱氢氧化的异柠檬酸，为进一步的氧化脱羧反应作准备。

测定原理：

ACO  催化柠檬酸转化成异柠檬酸，异柠檬酸氧化脱羧将 NAD+  还原生成 NADH，导致 340nm  处光吸收上升。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL  石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min   以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2、样本测定

（1）将工作液，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min；现配现用；若分次用将工作液分装后于-20°保存，一星期内可用。

（2）在 1mL  石英比色皿中加入 100 μL  样本 900 μL   工作液，混匀，立即记录 340nm   处 20s   时的吸光值 A1  和 3min20s  后的吸光值 A2，计算Δ A=A2-A1。

注 意：

正式测定前务必取 2-3  个预期差异较大的样本做预测定。