抗坏血酸过氧化物酶（APX）检测试剂盒（分光光度法50T/48S）

抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）活性测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX 具有多种同功 酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化 H2O2 氧化 AsA，是植物 AsA 的主要消耗者。APX 的活性直接影响到 AsA 的含量，APX 与 AsA 具有一定 的负相关性。 

测定原理：

APX 催化催化 H2O2 氧化 AsA，通过测定 AsA 氧化速率，来计算得 APX 活性。

自备仪器和用品：

低温离心机、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。

粗酶液提取： 

按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）进行 冰浴匀浆。13000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。

测定：

1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 290nm，用蒸馏水调零。

2. 试剂一在 25℃中预热 30min。 

3. 依次在 1ml 石英比色皿中加入 100μl 上清液、700μl 预热的试剂一、100μl 试剂二和 100μl 试剂三，迅速 混匀后在 290nm 测定 10 s 和 130 s 光吸收 A1 和 A2，△A=A1-A2。

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