过氧化氢(H2O2)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
H2O2 是生物体内最常见的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化产生,由 CAT 和POD 等催化降解。 H2O2 不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面 H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
测定原理:
H2O2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在 415nm 有特征吸收。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、丙酮 60mL 、浓盐酸 10mL 、研钵和冰。操作步骤:1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、在 EP 管中按顺序加入下列试剂。
试剂名称(μL)
测定管
对照管
样本
吸取的量的为全部上清液
试剂一
1000
试剂二
100
试剂三
200
4000g ,25℃离心 10min,弃上清,留沉淀
试剂四
加入试剂四溶解沉淀后,室温静置5min,倒入比色皿中,测定 415nm 处吸光值 A。对照管只要做一次即可。计算 ΔA =A 测定-A 对照。
注 意:
正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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