过氧化物酶(POD)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
POD(EC 1.11.1.7 )广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
测定原理:
POD 催化 H2O2 氧化特定底物,在 470nm 有特征光吸收。。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤和加样表:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 470nm,蒸馏水调零。
2 、工作液的配制:临用前将试剂一、试剂二、试剂三按照 2.6(mL):1.5 (μL):1 (μL)的比例混匀;在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10min 以上;现配现用。
3 、在 1mL 玻璃比色皿中加入 50μL 样本和 950μL 工作液,混匀,记录 470nm 下 1min 时吸光值 A1 和 2min后的吸光值 A2 。计算 ΔA =A2-A1。
注 意:
如果 ΔA 小于 0.005 ,可将反应时间延长到 5min 。如果 ΔA 大于 0.5,可将样本用提取液稀释后测定,计算公式中乘以相应稀释倍数。
上海酶联生物科技有限公司
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