多酚氧化酶(PPO)测定试剂盒/微量法/48样 新品

多酚氧化酶(PPO)测定试剂盒/微量法/48样

测定意义：

PPO（EC1.10.3.1）主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化产生醌，从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。

测定原理：

PPO 能够催化邻苯二酚产生醌，后者在 525nm 有特征光吸收。

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：
1、光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 525nm，蒸馏水调零。

2、样本测定（在 EP 管中依次加入下列试剂）。

37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）中准确水浴 10min 后，95℃水浴 5min ，冷却至室温，10000g ，25℃离心 10min ，收集上清，取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中，525nm 处检测测定管和对照管吸光度，计算 ΔA=A 测定-A 对照。

注 意：

煮沸样本的操作：取 300μL 离心上清于 EP 管中，进行 5min95℃水浴处理；每个测定管需要设一个对照管，可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行 5min95℃水浴处理。