NADPH-细胞色素C还原酶(NCR)测定试剂盒/分光光度法/48样 新品

NADPH-细胞色素C还原酶(NCR)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

细胞色素 P450 酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。NCR 作为 P450 酶系的重要一员，催化氧化型 P450 还原再生。

测定原理：

NCR 催化 NADPH 还原氧化型细胞色素 c 生成还原型细胞色素 c ，还原型细胞色素 c 在550nm 处有特征吸收峰；通过测定 550nm 吸光度的增加速率，来计算 NCR 活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

测定操作：
1.  分光光度计预热 30 min ，调节波长到 550 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二在 37℃水浴中预热 30min。

3.  空白管：取 1mL 玻璃比色皿，依次加入 50μL 蒸馏水、900μL 试剂二、50μL 试剂三和 10μL 试剂四，迅速混匀后于 550nm 处测定2min 内吸光值变化，第 10 s 和第 130 s 吸光值分别记为 A1 和 A2 ，△A 空白管 =A2-A1。

4. 测定管：取 1mL 玻璃比色皿，依次加入 50μL 粗酶液、900μL 试剂二、50μL 试剂三和 10μL 试剂四，迅速混匀后于 550nm 处测定2min 内吸光值变化，第 10 s 和第 130 s 吸光值分别记为 A3 和 A4 ，△A 测定管 =A4-A3。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。