单宁酶(TAN)测定试剂盒/微量法/48样
测定意义:
单宁酶全称是单宁酯酰水解酶(Tannase ,EC 3.1.1.20),它可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键,生成没食子酸和葡萄糖。。
测定原理:
使用抗氧化剂没食子酸丙酯(PG)作为单宁酶酶促反应的底物,在 270nn 下测定底物 PG 反应前后的光密度变化,计算单宁酶酶活力。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、研钵、冰、蒸馏水。测定步骤:加样表
试剂名称(μL)
对照管
测定管
95℃水浴 5min 后灭活的粗酶液
50
粗酶液
试剂二
混匀,40℃准确保温 10 min 后,置 95℃水浴中 10 min(盖紧,防止水分散失),冷却
试剂一
900
混匀,取 200uL 至微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中,270nm 处读取各管吸光值。计算ΔA=A 对照-A 测定。每个测定管需设个一个对照管。
注 意:
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行 5min95℃沸水浴处理。
2、务必使用 96 孔 UV 板(非普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm 务必使用UV 板)。
上海酶联生物科技有限公司
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