血锌浓度测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
锌是必需的微量元素之一,在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。
测定原理:
在 pH 8.5~9.5 的溶液中,Zn2+与锌试剂生成蓝色配位化合物,在 620nm 有最大吸收峰。
自备仪器和用品:
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水和无水乙醇。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ,调节波长到 620 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管: 取 1.5 mL EP 管,依次加入 100 μL 蒸馏水, 100μL 试剂一,混匀; 室温, 13000g ,离心10min,小心吸取上清液 100 μL,加入 0.5 mL EP 管,加入 100μL 试剂二,100μL 试剂三,充分混匀后 13000g离心取上清,吸取 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,620 nm 测定吸光度,记为 A 空白管。
4. 标准管:取 1.5 mL EP 管,依次加入 100 μL 标准液, 100 μL 试剂一,混匀;室温, 13000g ,离心10min,小心吸取上清液 100 μL,加入 0.5 mL EP 管,加入 100μL 试剂二,100μL 试剂三,充分混匀后 13000g离心取上清,吸取 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,620 nm 测定吸光度,记为 A 标准管。
5. 测定管:取 1.5 mL EP 管,依次加入 100 μL 血清,200 μL 试剂一,混匀;室温,8000g ,离心 10min ,小心吸取上清液 100 μL,加入 0.5 mL EP 管,加入 100μL 试剂二,100μL 试剂三,充分混匀后 13000g 离心取上清,吸取 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,620 nm 测定吸光度,记为 A 测定管。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
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