血清铁浓度测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
测定原理:
亚硫酸钠还原血清 Fe3+生成成 Fe2+ ,Fe2+进一步与 2, 2’- 联吡啶显色,在 520nm 处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
自备仪器和用品:
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。
测定:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ,调节波长到 520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取 EP 管,依次加入 125 μL 蒸馏水,125 μL 试剂一,125 μL 试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入 62 μL 氯仿(自备),充分震荡混匀;室温 10000rpm ,离心 10min,小心吸取上层液 210 μL,加入微量石英比色皿/96 孔板,于 520 nm 测定吸光度,记为 A 空白管。
4. 标准管:取 EP 管,依次加入 125 μL 标准液,125 μL 试剂一,125 μL 试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min , 自来水冷却。加入 62 μL 氯仿,充分震荡混匀;室温 10000rpm ,离心 10min ,小心吸取上层液 210 μL,加入微量石英比色皿/96 孔板,于 520 nm 测定吸光度,记为 A 标准管。
5. 测定管:取 EP 管,依次加入 125 μL 血清,125 μL 试剂一,125 μL 试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min , 自来水冷却。加入 62 μL 氯仿,充分震荡混匀;室温 10000rpm ,离心 10min ,小心吸取上层液 210 μL,加入微量石英比色皿/96 孔板,于 520 nm 测定吸光度,记为 A 测定管。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
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