亚硝酸还原酶(NiR)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
硝酸还原酶(NiR)是一类能催化亚硝酸盐还原的酶,广泛存在于微生物及植物体内,是自然界氮循环过程中的关键酶,可以将亚硝酸盐降解为 NO 或 NH3,从而减少环境中亚硝态氮的积累,降低因亚硝酸盐累积而造成的对生物体的毒害作用。
测定原理:
亚硝酸还原酶可将 NO2—还原为 NO ,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的 NO2—减少,即 540nm处吸光值的变化可反应亚硝酸还原酶的活性。
需自备的仪器和用品:
天平、研钵、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL 玻璃比色皿。测定操作表:
空白管
对照管
测定管
样本(μL)
100
蒸馏水(μL)
200
试剂一 (μL)
试剂二(μL)
混匀后,25℃反应 1h
试剂三(μL)
充分震荡 30S
上清液(μL)
350
工作液(μL)
700
充分混匀,蒸馏水调零,静置 3min 后测定540nm 处吸光值,分别记为 A 空白管、A
对照管、A 测定管。空白管只要做一管,每个测定管需设一个对照管。
注 意:
1. 配制好的工作液 3 天内使用完。
2. 若吸光值超过 3,将上清液进行适当的稀释后再加入工作液显色,并在计算公式中乘以稀释倍数。
3. 严格控制显色时间,否则会对结果有影响。
4. 标准曲线线性范围为 0.03μmol/mL-1.5μmol/mL。
5. A 空白管-(A 测定管-A 对照管)线性范围为 0.02-3。
上海酶联生物科技有限公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!