谷氨酸脱氢酶(GDH)测定试剂盒/微量法/96样 新品

谷氨酸脱氢酶(GDH)测定试剂盒/微量法/96样

测定意义：

GDH（EC 1.4.1.2 ）广泛分布于植物中，和谷氨酸合成酶（GOGAT）共同参与谷氨酸的合成，在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。

测定原理：

GDH 催化 NH4+ 、 α-酮戊二酸和 NADH ，生成谷氨酸和 NAD+ ，引起 340nm 吸光度下降。通过测定 340nm吸光度的下降速率，计算 GDH 活性。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2、样本测定

(1)在试剂二中加入 10mL 试剂一充分溶解混匀，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴5min；现配现用（配好后 12h 内用完）；

(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 190μL 试剂二，混匀，立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2 ，计算 ΔA=A1-A2。。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。