亮氨酸氨基肽酶(LAP)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,广泛存在于肝、肾、胰等组织中,尤其以肝脏中含量最为丰富。各类肝病患者因肝细胞损伤,血清 LAP 的活性均有不同程度的升高,因此,血清 LAP 活性的检测能从不同侧面反映各种肝病的发生和发展。
测定原理:
LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 LAP 活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂二转移至试剂一中充分溶解(如较难溶解,可 50℃水浴加热约30min 促进溶解);在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 250μL 样本和 750μL 试剂一,混匀后立即记录 405nm 处初始吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2 ,计算 ΔA=A2-A1。注 意:
若 ΔA 大于 0.5,需将酶液用提取液稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。使 A2-A1 小于 0.5,可提高检测灵敏度。
上海酶联生物科技有限公司
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