过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒(紫外法)/96样
测定意义:
氢氧自由基(OH · ) 是化学性质最活泼的活性氧,它几乎与细胞内的每一类有机物如糖、氨基酸、磷脂、核苷酸和有机酸等都能反应,并且有非常高的速度常数,因此它的破坏性极强,但它可以被过氧化氢酶分解,因而测定过氧化氢酶的高低就有其重要意义。
测定原理:
红细胞或组织中过氧化氢酶(Catalase)在一定条件下能直接分解其底物过氧化氢(H2O2),使 H2O2 在反应液中的浓度逐渐降低,相应的吸光度也逐渐下降。
操作步骤:
1﹑样本前处理:
①﹑溶血液的制备:
取老鼠的新鲜血液 50 l 加双蒸水至 2.5ml 混匀配成1:49 溶血液。
②﹑1%肝组织匀浆的制备:
按《实验方法学》制备 10%肝组织匀浆,再取部分 10%肝组织匀浆,用生理盐水按 1︰9 稀释制备成 1%肝组织匀浆。注意:
1、为了减少误差,两只石英比色杯要进行校正。
2、每次加样前比色杯要用双蒸水冲洗 2~3 次,扣干备用。
3、每次比色前(加样前)比色杯的透光面要用擦镜纸擦干净。
4、比色与计时要同步,最好为二个人或者用自动生化分析仪。
5、加样品量不可太大,以免产生气泡影响吸光度。
6、1:100 的溶血液放置室温下不可超过 2 小时。
7、脑组织和神经组织中过氧化氢酶活力非常低。
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