过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒(紫外吸收法)/分光光度法/96样
测定意义:
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的 H2O2 清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。
测定原理:
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H2O2 ,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 240nm,蒸馏水调零。
2 、 测定前将 CAT 检测工作液在37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3 、 准备 96 孔 UV 板一块(非普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm 务必使用UV 板)。
4 、 在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中加入 10μL 样本和 190μL 工作液,混匀,记录 240nm 下初始吸光值A1 和 1min 后的吸光值 A2 。计算 ΔA =A1-A2。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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