乙酰乳酸合成酶(ALS)活性试剂盒分光法/24样
产品简介:
乙酰乳酸合成酶( ALS, EC 2.2.1.6) 是支链氨基酸生物合成途径中的一个关键酶,此生物合成过程只存在于植物和微生物体内,是绿色除草剂的重要作用靶标。
乙酰乳酸合成酶( ALS)可催化 2 分子的丙酮酸生成乙酰乳酸,该产物在硫酸作用下脱羧生成乙酰甲基甲醇,该产物与显色剂反应生成有色物质,该有色物质在 525nm 处有特征吸收峰,通过检测该有色物质的增加速率即可得出 ALS 酶活性大小。
反应方程式:2 pyruvate =2-acetolactate+CO2。所需的仪器和用品:紫外分光光度计、 1mL 石英比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉体 mg×1 支
临用前甩几下使粉体落入底部,再加 1.2mL
蒸馏水混匀溶解,仍 4℃保存。
试剂二
液体 15mL×1 瓶
试剂三
液体 2mL×1 支
试剂四
液体 10mL×1 瓶
试剂五
标准品
粉体×1 支
若重新做标曲,则用到该试剂。
所需的仪器和用品:紫外分光光度计、 1mL 石英比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
乙酰乳酸合成酶( A LS)活性测定:建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!样本制备:① 组织样本:
取 0.2g 组织样本(若样本较大可研磨粉碎后取样),加 1mL 的蒸馏水研磨匀浆,全部转移至 2mLEP 管中,再依次加入 0.06mL 试剂一和 10mg 的活性炭混匀,放置于可调式往返振荡机上(200 次/min)振荡 30min(如无此仪器需间隔 3min 手动晃动几秒)。再依次加入 0.02mL 的试剂二和 0.02mL 的试剂三, 充分混匀, 加 0.9mL 蒸馏水定容至2mL,混匀后室温放置 5min。 12000rpm 室温离心 5min,澄清的上清液做为样本待检上清液;空白待检上清液制备过程除了不加样本之外,其他操作步骤同组织样本制备过程。
上海酶联生物科技有限公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!