乙酰乳酸合成酶(ALS)活性试剂盒微板法/48样
产品简介：
乙酰乳酸合成酶(ALS,EC2.2.1.6) 是支链氨基酸生物合成途径中的一个关键酶，此生物合 成过程只存在于植物和微生物体内，是绿色除草剂的重要作用靶标。
乙酰乳酸合成酶(ALS)可催化2分子的丙酮酸生成乙酰乳酸，该产物在硫酸作用下脱羧生 成乙酰甲基甲醇，该产物与显色剂反应生成有色物质，该有色物质在525nm 处有特征吸 收峰，通过检测该有色物质的增加速率即可得出 ALS 酶活性大小。
反应方程式：2 pyruvate =2-acetolactate+CO2.
试剂盒组成和配制：
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体100mL×1瓶 | ④℃保存 |
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试剂一 | 粉体mg×1支 | 4℃保存 | 临用前甩几下使粉体落入底部，再加1.2mL蒸馏水混匀溶解，仍4℃保存。 |
试剂二 | 液体15mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂三 | 液体2mL×1支 | 4℃保存 |
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试剂四 | 液体10mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂五 | 液体10mL×1瓶 | 4℃保存 |
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标准品 | 粉体×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲，则用到该试剂 |
所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、蒸馏水。
乙酰乳酸合成酶（ALS）活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
样本制备：
①组织样本：取约0.2g 组织(水分充足的样本可取0.5g), 加 入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆，4℃×12000rpm 离心15min, 取上清液待测。
[注]: 若增加样本量，可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL)为1:5~10的比例提取 ②细菌/细胞样本：先收集细菌到离心管内，离心后弃上清；取约500万细菌或细胞加 入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率200W, 超 声 3s, 间隔10s, 重 复30次);12000rpm 4℃离心10min, 取上清，置冰上待测。
[注]: 若增加样本量，可按照细菌/细胞数量(104):提取液 (mL) 为500~1000:1 的比例进行提取。
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