几丁质外切酶试剂盒分光法/24样
产品简介:
多种微生物、动物、植物等都可产生几丁质酶,高等植物本身不存在作为真菌细胞壁组分之一的几丁质,但当植物受到病原菌感染时,几丁质酶活性迅速提高。因此该酶与 植物对病原微生物的抗性有关,是重要的病程相关蛋白。几丁质酶主要水解几丁质多聚体中β-1,4-糖苷键。依据水解位置的不同可分为几丁质内切酶和几丁质外切酶,几丁质外切酶作用于几丁质后,生成 N- 乙酰氨基葡萄糖单体, 进一步与铁氰化钾反应,于420nm 处检测,进而计算得到几丁质外切酶活性大小。试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体30mL×1瓶
④℃保存
试剂一
液体7mL×1瓶
4℃保存
试剂二
粉体mg×1瓶
临用前甩几下使粉体落入底部,再加2.5mL盐酸充分混匀溶解后,再加2.8mL蒸馏水混匀备用。
试剂三
液体14mL×1瓶
所需的仪器和用品:可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、天平、水浴锅、低温离心机、盐酸。几丁质外切酶活性检测:建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!样本制备:①组织样本:
称取约0 . 1g 组织,加入1mL 提取液,进行冰浴匀浆,于4℃,12000rpm 离心10min, 取上清置冰上待测。
②真菌样本:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;取500万细胞加入1mL 提取液;冰浴超声波破碎细胞(功率300w, 超声3秒,间隔7秒,总时间3min); 于 4 ℃ , 12000rpm 离 心 1 0min, 取上清置于冰上待测。
上海酶联生物科技有限公司
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