超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(WST-8法)/微量法/96样
测定意义:
SOD(EC 1.15.1.1 )广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
测定原理:
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-) ,O2-可与 WST-8 反应产生水溶性染料甲臜,后者在 450nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液黄色越深,说明 SOD 活性愈低,反之活性越高。
自备仪器和用品:
酶标仪、离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 450nm。
2、试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释 50 倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水 1 :49 稀释。
3、工作液配制:在试剂一加入 100 μL 试剂二,充分混匀。配好的试剂 4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照 20mL:0.1mL 的比例混匀配制)
4、将一瓶试剂四用 5mL 蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、样本测定(在 96 孔板中依次加入下列试剂)。
试剂名称(μL)
测定管
对照管
样本
10
蒸馏水
试剂三(稀释后)
工作液
160
试剂四
20
充分混匀,室温静置 30min 后,450nm 处测定各管吸光值 A。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!