超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(NBT法)/分光光度法/96样
测定意义：
SOD（EC 1.15.1.1 ）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成 H2O2和 O2 。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是 H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。
测定原理：
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-)，O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，后者在 560nm 处有吸收；SOD 可清除 O2-，从而抑制了甲臜的形成；反应液蓝色越深，说明 SOD 活性愈低，反之活性越高。
自备仪器和用品：
酶标仪、离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
测定步骤：
1、 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 560nm。
2 、将试剂二用蒸馏水稀释两倍，用多少配多少。（试剂二和蒸馏水 1 ：1 稀释）
3 、将一瓶试剂四用 5mL 蒸馏水溶解（溶解后一周内用完），再用蒸馏水稀释 4 倍，用多少配多少（试剂四和蒸馏水 1 ：3 稀释）。
4 、测定前将试剂一、三和四在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）水浴 5min 以上。
5、 样本测定（在 EP 管或 96 孔板中依次加入下列试剂）。
试剂名称(μL） | 测定管 | 对照管 |
试剂一 | 45 | 45 |
试剂二 | 2 | 2 |
样本 | 18 |
|
蒸馏水 |
| 18 |
试剂三 | 35 | 35 |
试剂四 | 100 | 100 |
充分混匀，室温静置 30min 后，560nm 处测定各管吸光值 A。 |
注 意：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1，建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用（10 μL 试剂二原液+60μL 蒸馏水）。
4 、SOD 为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是
（1）试剂二或试剂四没有现配现用；
（2) 没有按顺序加试剂；
（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间 30min 可以延长到 40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10 倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
关键字： SOD 试剂盒 ; SOD ELISA KIT ; SOD ELISA试剂盒 ;
上海酶联生物科技有限公司，成立之初，获得国内外酶联免疫同行的大力支持，公司为了感恩于同行无私的帮助，特取意酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA试剂盒）的“酶联”两字，时刻铭记回报社会，公司已制定十年内，将公司打造成国内酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）行业超级航母，并且，这么多年，我们一直是为了这个愿景，坚定不移的努力奋斗着。