谷胱甘肽S转移酶(GST)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义：
GST 是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。GST 是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与 GSH 的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此，GST 在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外，因为 GST 具有 GSH-Px 活性，亦称为 non-Se GSH-Px ，具有修复氧化破坏的大分子如 DNA、蛋白质等的功能。注意，GST 催化的反应减少GSH 含量，但是不增加 GSSG 含量。
测定原理：
GST 催化 GSH 与 CDNB 结合，其结合产物的光吸收峰波长为 340nm；通过测定 340nm 波长处吸光度上升速率，即可计算出 GST 活性。
自备仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL 石英比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
1. 分光光度计预热 30 min ，调节波长到 340 nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂三放在 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）保温。
3. 测定管：取 1mL 石英比色皿，加入 100μL 上清液，900μL 试剂二和 100μL 试剂三，迅速混匀后于 340nm测定吸光度变化，记录 10 s 和 310 s 吸光度为 A1 和 A2。
注 意：
1. 样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力；
2. 细胞中 GST 活性测定时，细胞数目须在 300 万-500 万之间，细胞中 GST 的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理，不能用细胞裂解液处理细胞；
3. 本法测定 GST 活性的线性范围可达 76 μmol/min /L ，测定前先用 1～2 个样做预实验，如 5min 内反应不成线性，须对样品用蒸馏水稀释，计算结果乘以稀释倍数；
4. 测定反映的温度对测定结果有影响，请控制在 25℃或者37℃（哺乳动物）。
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