蛋白质羰基测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志,其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
测定原理:
羰基与 2,4-二硝基苯肼反应生成红色 2,4-二硝基苯腙,在 370nm 处有特征吸收峰。
自备仪器和用品:
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水、无水乙醇、乙酸乙酯。测定步骤和操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热 30min ,调节波长至 370nm。
2 、 操作表。
对照管
测定管
样品(μL)
60
试剂二(μL)
120
试剂三(μL)
混匀,37℃避光反应 1h
试剂四(μL)
150
静置 5min ,4℃ , 12000g 离心 15min,弃上清,留沉淀
试剂五(μL)
300
漩涡混匀,4℃ , 12000g 离心 10min,弃上清,留沉淀
试剂六(μL)
漩涡混匀,37℃温育 15min ,沉淀全部溶解后,4℃ , 12000g 离心 15min ,取上清 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板中,测定 A370 。ΔA=A 测定管-A 对照管
注 意:
正式实验之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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