产品原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用特异性探针与靶DNA序列杂交，通过荧光信号实时监测扩增进程，实现对川芎（Rhizoma chuanxiong）DNA的高灵敏、高特异性检测。适用于物种鉴定、基因表达分析及质量控制等领域。
产品名称 | 川芎探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Rhizoma Chuanxiong Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5159 |
试剂盒组成
PCR预混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂及优化缓冲液（2×浓度）。
特异性引物与探针：针对川芎保守基因区域设计，确保无交叉反应。
阳性对照：已知拷贝数的川芎DNA片段（1×10^8 copies/μL）。
阴性对照：无DNA模板的缓冲液。
核酸释放剂（可选）：用于复杂样本的DNA提取。
实验步骤
样本准备：
样本类型：组织、细胞或药材粉末，需提取DNA（避免直接提供RNA或降解DNA）。
保存要求：液氮、-80℃或Trizol中保存。
标准曲线制备（定量分析时需用）：
将阳性对照按10倍梯度稀释（10^2–10^7 copies/μL），每个浓度设3复孔。
PCR反应体系（20μL体系为例）：
加入10μL 2×预混液、1μL引物探针混合液、2μL DNA模板，用超纯水补足至20μL。
扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）。
结果分析：
定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型为阳性；
定量：通过标准曲线计算模板初始拷贝数。
产品特点
高特异性：引物经生物信息学验证，仅扩增川芎目标序列。
高灵敏度：最低检测限达10^3 copies/mL。
快速便捷：3-4小时完成检测，含上样染料可直接电泳。
稳定性：批内和批间重复性误差＜5%。
注意事项
避免反复冻融试剂，解冻后需涡旋混匀。
操作分区进行（样本制备、PCR配制、扩增区），防止污染。
本试剂盒仅限科研用途，不适用于临床诊断。
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