预期用途
用于检测川楝子核酸，适用于科研领域，不用于临床诊断。
产品名称 | 川楝子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Toosendan Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR5163 |
检验原理
采用TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物和探针靶向川楝子基因保守区域。扩增过程中，探针被Taq酶切割释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度实现定性或定量分析。
试剂组成
核心组分：
探针法qRT-PCR缓冲液
酶混合液（含逆转录酶及Taq DNA聚合酶）
荧光标记探针及引物混合液
阳性对照（无传染性DNA片段，1×10^8拷贝/μL）
阴性对照（无核酸酶水）
其他：说明书、专用模板稀释液。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤7次）。
运输：低温（-20℃）冰袋运输。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI系列、Bio-Rad、LightCycler等），需配备FAM荧光通道。
样本要求
样本类型：全血、血清、粪便、拭子等，避免交叉污染。
保存：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月），运输需2~8℃冰袋。
操作步骤
标准曲线制备：
阳性对照梯度稀释（10^1~10^6拷贝/μL），独立操作避免污染。
核酸提取：
推荐使用商品化RNA提取试剂，纯化后模板保存于-15℃以下。
PCR反应体系配制（20μL/管）：
| 成分 | 体积（μL） |
| qRT-PCR缓冲液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 探针 | 1 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板RNA/DNA | 5 |
扩增程序：
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
扩增：40循环（94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟，采集FAM信号）。
结果分析
定量检测：以Ct值为纵轴、标准品log浓度为横轴绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性判定：
阳性：Ct≤35，扩增曲线呈典型S型。
可疑（35<Ct<40）：需复测，复测Ct<40判为阳性。
阴性：Ct≥40或无扩增。
注意事项
分区操作（试剂配制、样本处理、扩增），避免污染。
使用无核酸酶耗材（吸头、离心管）。
试剂完全解冻后混匀离心，避免气泡。
阳性对照单独存放，严禁用于人体。
免责声明
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断或治疗。
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