产品信息：
1. 细胞背景与基本特性
母本细胞：A498 (人肾癌细胞)
种属来源：人 (Homo sapiens)
组织来源：肾脏（肾透明细胞癌）
供体信息：源自一位 52 岁女性肾癌患者的肾组织。
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样（多边形，铺路石状）
产品名称 | 人肾癌细胞 +luc;A498-PLV-LUC-BSD | 英文名称 | A498-PLV-LUC-BSD：A498PLVLUCBSD |
货号 | AXB10675 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
标记基因：
LUC：荧光素酶，可用于生物发光检测（需底物荧光素）。
BSD：杀稻瘟菌素抗性，用于维持筛选压力，确保标记基因的稳定表达。
应用领域：肾细胞癌机制研究、抗肿瘤药物筛选、裸鼠成瘤实验及转移灶示踪。
核心参数速览
特征 描述
培养基 MEM + 10% FBS + 1% P/S
生长状态 贴壁生长 (上皮样)
传代比例 1:2 ～ 1:4
消化时间 1-3 分钟 (胰酶消化)
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO 或专用冻存液
详细培养操作指南
A498-Luc 细胞的培养方式与普通 A498 细胞基本一致，主要区别在于培养基中需要添加筛选抗生素以维持荧光素酶的表达。
基础培养条件
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：饱和湿度
推荐培养基配方
基础培养基：MEM (Minimum Essential Medium)（这是 A498 细胞的标准培养基，通常需添加 NEAA 非必需氨基酸）。
血清：10% 胎牛血清 (FBS)。
双抗：1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
筛选抗生素：杀稻瘟菌素 (Blasticidin, BSD)。
注意：为了防止报告基因丢失，建议在培养基中持续添加适量的杀稻瘟菌素（具体浓度需参考构建时的筛选浓度，通常为 2-10 μg/mL）。
传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)
A498 细胞贴壁较牢，呈上皮样，需用胰酶消化。
弃液：吸去旧的培养上清液。
润洗：加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液，轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次，弃去 PBS。
消化：加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液（T25 瓶加 1-2 mL），置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟。
注意：A498 细胞铺展面积大，消化时需在显微镜下观察，待细胞间隙变大、细胞回缩变圆并开始脱落时，立即终止消化。
终止：加入含血清的完全培养基终止消化。
离心与分装：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 3-5 分钟。弃上清，重悬后按 1:2 至 1:4 的比例分装到新瓶中。
冻存与复苏
冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。
复苏：37℃ 水浴快速摇晃解冻，立即转移至含完全培养基的离心管中混匀，离心去除上清（去除 DMSO），重悬后接种。
注意事项与常见问题
运输中的脱落（常见问题）：
贴壁细胞在运输途中可能因震动导致部分或全部脱落。收到细胞后，如果发现瓶底无细胞或细胞极少，请务必离心运输培养基，将管底沉淀的细胞团块重悬接种，不要直接丢弃。
荧光素酶活性检测：
该细胞表达荧光素酶，可用于活体成像。在进行动物实验前，建议先在体外验证荧光素酶的表达活性（加入荧光素底物后检测发光值）。
筛选压力：
如果在培养过程中去除了杀稻瘟菌素（BSD），部分细胞可能会丢失 LUC 报告基因，导致荧光信号减弱。建议在实验对照组中保持抗生素筛选。
细胞密度监控：
A498 细胞在低密度下生长可能较慢，建议保持适当的密度传代。
总结：A498-PLV-LUC-BSD 是一种贴壁生长的标记肾癌细胞系。它的培养关键在于回收运输后脱落的细胞以及添加杀稻瘟菌素（BSD）以维持荧光素酶表达。该细胞系是肾癌活体示踪和药效评价的有力工具。
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细胞类型与特性原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。
细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。
细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。
根据生长方式分为：
贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字： A498-PLV-LUC-BSD;人肾癌细胞 +luc;贴壁细胞;
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