胃癌细胞+luc;AGS-plv-luc-puro
产品信息：
1. 细胞基本特性与背景
亲本来源： 源自人胃腺癌细胞 AGS（该细胞系源自一个未经治疗的胃癌切除肿瘤，具有上皮样形态）。
标记基因：
LUC： 荧光素酶基因，用于生物发光检测。
Puro： 嘌呤霉素抗性基因，用于筛选和维持质粒稳定性。
细胞类型： 肿瘤细胞（胃腺癌细胞）。
生长特性： 贴壁生长。
细胞形态： 上皮细胞样。
应用领域： 仅限科研使用，主要用于胃癌机制研究、抗肿瘤药物筛选及活体成像。
产品名称 | 胃癌细胞+luc;AGS-plv-luc-puro | 英文名称 | AGS-plv-luc-puro：AGSplvlucpuro |
货号 | AXB10676 | 生长特性 | 贴壁生长 |
培养条件与完全培养基配置
AGS-LUC 细胞的培养基配置通常沿用 AGS 细胞的培养条件，但为了维持荧光素酶的表达，通常需要添加抗生素筛选。
基础培养基： F12K (Kaighn's Modification of Ham's F-12 Medium)。
添加成分：
胎牛血清 (FBS)： 10%。
双抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%。
嘌呤霉素 (Puromycin)： 1-10 μg/mL（用于维持筛选压力，防止荧光素酶基因丢失。具体浓度请参考供应商说明书，通常维持在1-2 μg/mL即可）。
培养环境：
温度： 37℃。
气相： 5% CO，95% 空气。
湿度： 饱和湿度。
详细培养操作指南
细胞复苏
快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，轻轻摇晃，使其在 1 分钟内完全融化。
稀释离心： 用酒精消毒管壁，将细胞悬液缓慢加入含 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中混匀。1000 rpm 离心 3-5 分钟。
重悬接种： 弃去上清，加入含嘌呤霉素的完全培养基重悬细胞，接种到 T25 培养瓶中。
静置培养： 次日观察细胞贴壁情况，建议更换新鲜培养基以去除残留的 DMSO。
细胞传代（当细胞密度达 80%-90% 时）
弃液洗涤： 弃去旧培养基，用不含钙镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
消化： 加入 0.25% 胰蛋白酶（Trypsin-EDTA，约 1-2 mL），放入 37℃ 培养箱消化 1-3 分钟。
注意：AGS 细胞贴壁较牢，消化时间可能比普通细胞稍长，需在显微镜下观察。
终止消化： 待细胞间隙变大、变圆脱落时，加入含血清的培养基终止消化。
离心分瓶： 将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm 离心 5 分钟。弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:3 的比例分装传代。
细胞冻存
收集： 按传代步骤收集处于对数生长期的细胞。
冻存液： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或者专用的无血清冻存液。
程序降温： 将冻存管放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱 过夜，第二天转入 液氮罐 长期保存。
关键注意事项（必读）
荧光素酶表达稳定性（关键）：
由于该细胞携带 puro 抗性基因，为了防止长期传代过程中荧光素酶基因丢失（质粒漂移），建议在平时的培养基中维持 低浓度的嘌呤霉素（如 1-2 μg/mL）。
如果发现荧光强度减弱，可以进行高浓度嘌呤霉素（如 20 μg/mL）的短期筛选。
贴壁较牢：
AGS 细胞属于贴壁非常牢固的细胞。传代时需要耐心等待胰酶发挥作用，切勿强行吹打，以免损伤细胞膜。
生长速度：
该细胞生长速度属于中等，倍增时间约为 20-24 小时。传代后通常需要 2-3 天才能长满。
生物安全等级：
属于 BSL-2 细胞，操作时需在生物安全柜中进行，并穿戴适当的防护装备。
总结
AGS-plv-luc-puro 是研究胃癌及进行活体成像的理想工具。培养它的核心在于控制消化时间（因为贴壁较牢）和维持抗生素筛选压力（以保证荧光素酶的持续高表达）。只要掌握好这两点，它就能为你提供稳定的发光信号和可靠的实验数据。
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注意事项与应用无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字： AGS-plv-luc-puro;胃癌细胞+luc;贴壁细胞;
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