产品信息:

特征维度 详细信息
亲本来源 人胚肾细胞 (HEK-293T)
标记基因 荧光素酶 (LUC)
筛选抗性 嘌呤霉素 (Puromycin)
生长特性 贴壁生长 (但贴壁非常弱)
细胞形态 上皮细胞样
核心能力 高转染效率、包装病毒 (慢病毒/逆转录病毒)
生物安全等级 BSL-2
产品名称 | 人胚肾细胞+LUC;293T-LUC-puro | 英文名称 | 293T-LUC-puro:293TLUCpuro |
货号 | AXB10680 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
核心特性与应用

自带“夜视仪”: 由于表达了荧光素酶,你可以在小鼠体内通过注射荧光素底物,实时监测肿瘤的生长、转移及药物治疗效果(活体成像)。
病毒包装神器: 293T 细胞是目前包装慢病毒、腺病毒和逆转录病毒最常用的细胞系。LUC 标记让你在病毒包装成功后,能直接通过荧光素酶活性检测病毒滴度或感染效率。
报告基因实验: 常用于启动子活性分析、信号通路验证(如 NF-κB, Wnt 等)以及 miRNA 与靶基因相互作用的研究。
培养操作手册

基础培养条件
基础培养基: 高糖 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)。
血清: 10% 胎牛血清 (FBS)。
添加剂: 1% 青霉素-链霉素 (双抗)。
特殊添加 (关键): 为了维持 LUC 基因的稳定表达,培养基中通常需要添加 嘌呤霉素 (Puromycin)。具体浓度需参考说明书(通常为 1-4 μg/mL,部分细胞系可能不需要持续加压,视构建方式而定)。
环境: 37℃,5% CO,饱和湿度培养箱。
传代操作 (关键步骤)
注意:293T 细胞贴壁非常弱,像“墙皮”一样,一碰就掉。操作必须轻柔!
观察: 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。
清洗: 弃去旧培养基,用不含钙镁的 PBS 轻柔润洗一次(动作要轻,防止把细胞冲下来)。
消化: 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA),放入培养箱消化 30秒 - 1分钟。
注意: 时间很短! 显微镜下观察到细胞间隙变大、稍微变圆即可。千万不要消化太久,否则细胞会成片脱落成团,很难吹散。
终止: 迅速加入含血清的完全培养基终止消化。
吹打: 轻柔吹打使细胞分散成单细胞悬液(不要用力过猛,否则细胞膜容易破)。
离心: 1000 rpm 离心 3-5 分钟,弃上清。
重悬: 加入新鲜完全培养基(含 Puromycin),按 1:2 至 1:3 的比例传代。
收货处理

常温运输(T25瓶):
收到后酒精消毒瓶壁,放入培养箱静置 2-4小时。
重点: 293T 细胞运输途中极易脱落。如果镜下发现瓶底有大量漂浮的细胞团,不要扔! 将培养基转移到离心管,离心(1000rpm, 5min)收集细胞,弃上清,用 PBS 重悬沉淀后,重新接种到原瓶或新瓶中继续培养。
干冰运输(冻存管):
37℃水浴快速复苏,离心重悬后接种。
特别注意事项

轻拿轻放: 换液、传代时,动作一定要轻柔。加液时要贴着瓶壁缓缓加入,不要直接冲着细胞层倒下去,否则细胞会大片脱落。
温度敏感: 293T 细胞对温度变化敏感。培养基和 PBS 使用前最好在 37℃ 预热。
防聚团: 消化时间过长或吹打力度不够都会导致细胞聚团。如果传代后细胞抱团生长,只要不是特别大,通常不影响实验,但会影响计数准确性和铺板的均匀度。
STR鉴定: 建议定期进行 STR 鉴定,防止交叉污染。
总结
293T-LUC-puro = 293T 细胞 + 活体成像能力 + 抗生素筛选。
它是病毒包装、蛋白表达和活体示踪的全能型选手。
公司正在出售的产品:
Anti-phospho-P53 (Thr81)/FITC 荧光素标记0酸化抑制基因P53抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | GDPD5 英文名称: 甘油0酸二酯酶0酸结构域5抗体 0.2ml |
Anti-EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | MK(Midkine) 中期因子/肝素结合生长因子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
Anti-VEGFR3 内皮细胞生长因子受体-3Multi-class antibodies规格: 0.1ml | AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗原 0.5mg |
Rhesus antibody Rh Heamachrome 血红素抗体 规格 0.2ml | Bovine IgG/RBITC 罗丹明标记IgG 0.3ml |
phospho-Ret(Tyr1062) 英文名称: 0酸化原癌基因酪酸蛋白激酶受体RET抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh HOXB4 HOXB4抗体 规格 0.1ml |
AFA(Human anti-filaggrin antibody) ELISA Kit 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体 | CA ELISA Kit 大鼠儿茶酚胺Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-OMPC 大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh B7-DC/CD273/PDL2 程序性死亡配体2抗体 规格 0.1ml |
ADH ELISA Kit 大鼠乙醇脱氢酶 | ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂联素Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-OPCML /FITC 荧光素标记样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 人胚肾细胞+LUC;293T-LUC-puroRhesus antibody Rh Ube2L3 泛素蛋白连接酶L3抗体 规格 0.2ml |
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 荧光素标记0酸化信号转导和转录激活因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-CD170/Siglec-5 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
细胞类型与特性
原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-50代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字: 293T-LUC-puro;人胚肾细胞+LUC;贴壁细胞;
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