巴西出血热病毒检测试剂盒 新品

检测目标：特异性检测巴西出血热病毒（SABV），一种属于沙粒病毒科（Arenaviridae）的高致病性病原体，引致发热、出血及多器官衰竭，病死率可达30%。

方法原理：基于荧光定量RT-PCR，靶向SABV的**L基因（RNA依赖的RNA聚合酶）**保守区，通过FAM通道检测，搭配内参基因（如人类RNase P，HEX通道）监控样本质量。

适用样本：全血（急性期）、血清、尸检肝/脾组织（需灭活处理）。

2. 检测流程

样本灭活（BSL-4实验室外操作要求）：

56℃ 60分钟或γ射线辐照灭活病毒，确保生物安全。

RNA提取：

推荐磁珠法（如QIAamp Viral RNA Mini Kit），提取后立即逆转录。

RT-PCR扩增：

反应体系：

引物探针：L-F/R（FAM）、内参（HEX）。

循环程序：50℃ 15min（逆转录）→ 95℃ 3min →（95℃ 15s → 60℃ 45s）×45循环。

结果判读：

阳性：Ct≤35（FAM），且内参Ct≤30。

可疑：35<Ct<38，建议复测或测序确认（如靶向GP基因）。

3. 性能参数

指标 参数要求

灵敏度 ≤50 copies/反应

特异性 不与胡宁病毒（JUNV）等交叉

检出限 10^3 copies/mL（全血样本）

抗干扰性 耐受20%血红蛋白或组织裂解物

4. 注意事项

生物安全：

未经灭活样本需在BSL-4实验室操作，检测人员需接种疫苗（如适用）。

实验废弃物需121℃高压灭菌30分钟。

假阴性控制：

发病早期（<3天）病毒载量低，建议动态监测。

质控要求：

每批次含阴性对照（健康人血清）、灭活阳性对照（SABV假病毒颗粒）。

5. 应用场景

疫情应对：巴西出血热暴发时的快速病原确认（如亚马逊流域）。

输入性病例筛查：有疫区旅行史且出现出血热症状的患者检测。

科研监测：野生动物（如啮齿类）宿主携带率调查。