兽疫链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对兽疫链球菌（B组链球菌）基因组高度保守区域设计特异性引物。在反应体系中，若存在目标核酸模板，PCR扩增过程中SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定性或定量分析。

产品特点

高灵敏度：优化引物设计，检测限低至10拷贝/μL。

特异性强：引物经严格验证，不与相近菌种（如A组链球菌）发生交叉反应。

即开即用：预混反应液含PCR所需酶、dNTPs及缓冲液，仅需加入模板DNA。

质量控制：提供阳性对照（非活体DNA片段），便于区分假阴性结果。

适用范围：支持临床样本（血液、分泌物）、食品及环境样本的检测。

操作流程

样本前处理

临床样本（如血液、分泌物）：按无菌操作采集，EDTA抗凝处理后提取DNA。

食品/环境样本：参照微生物学标准预处理，富集后提取核酸。

试剂准备

解冻预混液：置于冰上缓慢融化，轻弹混匀后短暂离心（1000 rpm，10秒）。

配制反应体系（示例）：

预混液 10 μL

引物混合液 2 μL

模板DNA 2 μL

RNase-free水 6 μL

PCR扩增

程序设置（以ABI 7500为例）：

预变性：95℃ 3分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）

数据分析：通过扩增曲线和熔解曲线判定结果，Ct值≤35为阳性。

注意事项

防污染措施：分区操作（样本处理、PCR配制、扩增区），使用带滤芯枪头。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板水）及阳性对照（试剂盒提供）。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（有效期12个月）。

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