产品概述
本试剂盒专为乳房链球菌（Streptococcus uberis）的快速、高灵敏度检测设计，采用染料法荧光定量PCR技术，适用于科研领域的定性和定量分析。
产品名称 | 乳房链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Streptococcus uberis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4397 |
产品特点
高特异性：基于乳房链球菌保守序列设计的引物，避免交叉反应。
灵敏度高：检测限可达几百拷贝/反应。
操作简便：即开即用，兼容常规核酸提取方法。
稳定性强：-20℃保存，有效期12个月。
适用范围：50次20μL体系的荧光定量PCR反应。
试剂盒组成
预混PCR反应液（含染料）
阳性对照（1×10^8拷贝/μL）
DEPC-H2O（无核酸酶水）
使用说明书
实验步骤
1. DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA。
2. 标准曲线制备（样本制备区）
标记6支离心管（7至2号），每管加入45 μL DEPC-H2O。
在7号管中加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀，得到1×10^7拷贝/μL的标准品。
依次梯度稀释至1×10^2拷贝/μL（6至2号管），每步更换枪头。
3. PCR反应（扩增区）
反应体系：20 μL（含DNA模板、预混液、ROX参比染料）。
扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒，60℃ 30秒（荧光采集）。
数据分析
定量检测：以阳性对照log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性检测：
阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30且呈典型扩增曲线。
样本Ct≤35为阳性，≥40为阴性；35<Ct<40需重复检测。
注意事项
分区操作避免污染，尤其是标准品稀释需在独立区域进行。
试剂保存于-20℃，避免反复冻融。
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