检验原理

本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术,针对禽戊型肝炎病毒RNA保守区设计特异性引物,通过实时荧光监测扩增过程,实现对病毒RNA的定性或定量检测。
产品名称 | 禽戊型肝炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Hepatitis E Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4418 |

产品特点

高灵敏度:优化引物设计,检测限可达1000拷贝/反应。
特异性强:引物针对HEV高度保守区,避免与其他病原体交叉反应。
即开即用:预混反应体系,用户仅需提供RNA模板。
双重用途:支持定性和定量检测,定量线性范围覆盖5个数量级。
质控完备:含阳性和阴性对照,确保结果可靠性。
试剂组成

酶混合液:50 μL ×1管
反应预混液:500 μL ×2管
阳性质控品(HEV RNA):50 μL ×1管
阴性质控品(无核酸水):250 μL ×1管
注:不同批号组分不可混用。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI 7500
Agilent Mx3000P/3005P
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf RealPlex
样本要求
组织样本:取禽类肝脏组织,匀浆后提取RNA。
血液样本:采集全血5 mL,抗凝处理后分离血浆/血清。
保存条件:短期(24 h内)可于2~8℃保存;长期需-70℃以下冻存,避免反复冻融(≤3次)。
操作步骤

RNA提取:按标准方法提取样本RNA,建议使用商品化RNA提取试剂盒。
反应体系配制:按20 μL体系加入反应液、酶液及模板RNA。
PCR程序设置:
逆转录:50℃ 15分钟
预变性:95℃ 3分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(荧光采集)
结果判读:
定性检测:Ct值<40为阳性;≥40或无信号为阴性。
定量检测:通过标准曲线计算样本拷贝数。
注意事项

实验需在无菌环境下操作,避免RNA酶污染。
试剂保存于-20℃±5℃,避光运输,避免反复冻融(≤5次)。
若阳性对照无扩增或阴性对照出现Ct值,需重新检测。
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关键字: 禽戊型肝炎病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;