Жидкостная хроматография в настоящее время является одним из важных методов анализа следовых количеств компонентов вещества. Двухфазность в хроматографическом анализе относится к неподвижной фазе, имеющей большую удельную площадь поверхности, и подвижной фазе, несущей смесь, подлежащую разделению для протекания через неподвижную фазу. Хроматография с использованием жидкости в качестве подвижной фазы называется жидкостной хроматографией.
Жидкостная хроматография — это один из видов хроматографического метода, в котором принятой подвижной фазой является жидкость. Из-за того, что жидкость, содержащаяся в колонке, имеет более высокое сопротивление, чем газ в колонке, для увеличения скорости анализа люди обычно используют жидкостную хроматографию высокого давления, так называемую «жидкостную хроматографию высокого давления». По различию подвижной фазы ее можно разделить на жидкостно-твердую хроматографию и жидкостно-жидкостную хроматографию; в зависимости от типа равновесия неподвижной и подвижной фаз ее можно разделить на адсорбционную хроматографию, распределительную хроматографию, ионообменную хроматографию и гель-хроматографию. Его можно использовать для разделения и анализа органических, неорганических и полимерных жидкостей.
Краткая история
В 1906 году русский ботаник Цветт впервые применил колоночная хроматография для разделения пигментов растений и является одной из старейших жидкостных хроматографий. За последние 30 лет люди разработали различные виды хроматографии и стали важной частью химического анализа.
① классическая жидкостная хроматография: поток подвижной фазы вниз от верхнего конца трубки колонки под действием собственной силы тяжести; собирать сток за трубкой из нижней части колонны на выходе, а затем применять другие методы измерения с низкой скоростью анализа и низкой эффективностью;
② Тонкослойная хроматография: появилась примерно в 1940-х годах, проста в эксплуатации и имеет улучшенную скорость анализа, но имеет плохую воспроизводимость и трудна для количественного анализа;
③ Высокоэффективная жидкостная хроматография: после начала 1960-х годов Дж. К. Гиделингс дополнил теорию газовой хроматографии жидкостной хроматографией и заложил основу для ее модернизации. После этого технически люди использовали насос высокого давления, высокоэффективную неподвижную фазу и высокочувствительный детектор и разработали высокоэффективную жидкостную хроматографию с высокоскоростным анализом, высокой эффективностью разделения и автоматической работой. В 1971 году Р.А. Генри впервые применил его для анализа пестицидов.
Высокоэффективная жидкостная хроматография
Высокоэффективная жидкостная хроматография является одним из наиболее важных методов разделения современных аналитических химия. Он возник в классической жидкостной хроматографии с основным подходом, как показано ниже: используйте один растворитель определенной полярности или смешанный раствор разных пропорций в качестве подвижной фазы; закачать подвижную фазу в колонку, снабженную наполнителем; после внесения подвижной фазой введенного тестируемого образца в колонку каждый компонент последовательно поступал в детектор; используйте записывающее устройство или устройство обработки данных, чтобы запишите хроматограмму или выполните обработку данных для получения результатов измерения. Благодаря применению частиц наполнителя с различными характеристиками и жидкой подвижной фазы под давлением, метод разделения обладает высокой производительностью и быстротой анализа.
Высокоэффективный жидкостный хроматографический анализ подходит для определения и измерения наркотиков которые можно разделить на колонке, снабженной определенным наполнителем, в частности, для определения многокомпонентных препаратов, контроля примесей и определения макромолекул. Некоторые лекарства необходимо подвергнуть реакции дериватизации до или после хроматографического разделения, чтобы их можно было выделить или обнаружить. Обычно используемый наполнитель колонки включает: силикагель, используемый для нормально-фазовой хроматографии; химически связанная неподвижная фаза, в зависимости от связывающих групп, может использоваться как в обращенно-фазовой, так и в нормально-фазовой хроматографии; ионообменный наполнитель используется для ионообменной хроматографии; для эксклюзионной хроматографии используется макропористый наполнитель с определенной апертурой.
Высокоэффективная жидкостная хроматография состоит из основного насоса, инжектора, колонки, детектора и системы обработки хроматографических данных. Наиболее часто используемый детектор предназначен для обнаружения УФ и видимого света; другие детекторы также включают детектор показателя преломления и детектор рассеяния света при испарении и так далее. Сбор и обработка хроматографической информации часто происходят на информационных рабочих станциях и интеграторах. Градиентное элюирование можно получить с помощью программного управления с двумя насосами или одним насосом и пропорциональным клапаном.