β-玉米赤霉烯醇的检测方法

2020/10/20 9:12:51

概述[1][2]

β-玉米赤霉烯醇是玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)在动物体内代谢形成的主要衍生物之一。其具有雌激素样活性,对动物有较强的生殖毒性,此外还有细胞毒性、免疫毒性和遗传毒性等。β-玉米赤霉烯醇也是ZEA在动物体内的主要残留物之一,直接影响动物源性食品的品质和安全。

检测方法[2]

CN201611060193提供了一种粮食中玉米赤霉醇检测方法及试剂盒,包括玉米赤霉醇标准品、β-玉米赤霉醇 标准品、α-玉米赤霉烯醇标准品、β-玉米赤霉烯醇标准品、玉米赤霉酮标准品、玉米赤霉烯 酮标准品、生物素化玉米赤霉醇、抗鼠IgG偶联受体磁珠、链亲和素供体磁珠、抗玉米赤霉醇 单克降抗体和检测缓冲液,其中所述抗鼠IgG偶联受体磁珠包括100μg/mL受体磁珠,0.05% 的Proclin-300和PH7.4的PBS溶液;链亲和素供体磁珠包括100μg/mL供体磁珠,25mM的 HEPES、100mM的NaC1溶液和0.1%的Proclin-300;称取1g琼脂糖凝胶基质粉末,溶于1mmol/ LHCl中,然后置于烧结玻璃过滤器中使用1mmol/LHCl洗涤15min;配体偶联使用偶联缓冲液 0.2mol/LNaHCO3pH8.3溶解待偶联的β-玉米赤霉醇抗体和氯霉素抗体,获得抗体溶液,迅速将活化的琼脂糖凝胶基质转移到所述抗体溶液中,充分混匀上述的混和物2h;配体封闭封闭所有残留的活性基团,转移经处理的琼脂糖凝胶基质至0.1mol/LTris-HCl缓冲液中,室 温条件下静置2h;除去偶联后未偶联上的多余的配体依次用0.1mol/L醋酸/醋酸钠缓冲液和0.1mol/LTris-HCl缓冲液对经处理后的琼脂糖凝胶基质进行洗涤,至少洗涤3个循环。

所述所述抗鼠IgG偶联受体磁珠为1mg/mL,链亲和素供体磁珠为1mg/mL,抗玉米赤霉醇单克隆 抗体为1mg/mL,生物素化玉米赤霉醇0.5mg/mL;使用时,以总体积25μL计:其中抗鼠IgG偶联受体磁珠5μL、链亲和素供体磁珠5μL、抗玉米赤霉醇单克降抗体5μL、生物素化玉米赤霉醇5 μL、待测样品5μL。

降解方法[3]

CN201310676784.5提供一株用于降解玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇的保藏编号为CGMCC-No.8515的枯草芽孢杆菌ANSB0E1及其培养方法和应用。本发明还提供了利用菌株ANSB0E1的发酵液降解玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇的方法,将发酵液与玉米赤霉烯酮反应72小时,降解率可达88%以上;将发酵液与α-玉米赤霉烯醇反应72小时,降解率可达83%以上;将发酵液与β-玉米赤霉烯醇反应72小时,降解率可达80%以上。本发明的枯草芽孢杆菌降解活性高、特异性强、作用效果温和,不会破坏饲料中的营养成分,适用于去除饲料中的玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇。

主要参考资料

[1] 王凤丽. β-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的初步建立[D].扬州大学,2017.

[2] [中国发明] CN201611060193.5 一种粮食中玉米赤霉醇检测方法及试剂盒

[3] CN201310676784.5枯草芽孢杆菌ANSB0E1及其应用

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