背景[1-4]
大鼠脑膜组织提取物是大鼠脑膜组织的粗提产物，包含大鼠脑膜组织总的DNA/RNA，总蛋白及其细胞微环境的小分子物质。大鼠脑膜组织提取物可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
脑膜指的是颅骨与脑间有三层膜，由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜；三层膜合称脑膜。硬脑膜，是一厚而坚韧的双层膜。外层是颅骨内面的骨膜，仅疏松地附于颅盖，特别是在枕部与颞部附着更疏松，称为骨膜层；内层较外层厚而坚韧，与硬脊膜在枕骨大孔处续连，称为脑膜层。
硬脑膜，是一厚而坚韧的双层膜，外层是颅骨内面的骨膜，仅疏松地附于颅盖，特别是在枕部与颞部附着更疏松，称为骨膜层。但在颅的缝和颅底则附着更牢固，很难分离。颅内无硬膜内腔。硬脑膜内层较外层厚而坚韧，与硬脊膜在枕
蛛网膜是一层半透明的膜，位于硬脑膜深部，其间有潜在性腔隙为硬脑膜下隙。在一定部位，蛛网膜下腔扩展并加深，成为蛛网膜下池。其中的是小脑延髓池，它通过正中孔和前侧孔与第四脑室相通：桥池位于脑桥腹侧：脚间池位于脚间凹；交叉池位于视交叉前方。
软脑膜是紧贴于脑表面的一层透明薄膜，并伸入沟裂。在脑室壁的某些部位，软脑膜及其血管与室管膜上皮共同形成脉络组织。脉络组织中的血管反复分支成丛，突入脑室形成脉络丛。软脑膜是紧贴于脑表面的一层透明薄膜，并伸入沟裂。
应用[4][5]
可用于Ad-HGF转染大鼠脑膜间皮细胞的效率与细胞活性研究：
脑膜具有调节神经干／祖细胞(Neural stem/progenitor cell,NSPC)发育、分化与皮质神经再生的重要作用,其可诱导皮层NSPC激活反应和产生神经元,继而转为血管周细胞随微血管深入皮层,对胚胎发育及成年脑损伤后修复具有重要意义。肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)为一独立的促血管生成因子,越来越多的研究显示其具有神经营养、促神经发生、血管发生、轴突发生、减少瘢痕形成以及促脑室管膜下区(Subventricular zone,SVZ)神经干细胞增殖、分化作用。
体外原代培养SD大鼠脑膜间皮细胞并鉴定,用Ad5-EGFP、Ad-HGF转染RMMCs,测定重组腺病毒转染细胞的MOI值,观察转染后细胞上清液中HGF的表达及HGF对RMMCs增殖和迁移能力的影响。
方法：无菌条件下取出生1-2d SD大鼠的脑膜,采用机械吹打、轻消化法结合组织块培养法原代培养大鼠脑膜间皮细胞,传3代后,通过倒置相差显微镜观察细胞形态,普通光学显微镜观察细胞角蛋白、细胞波形蛋白、第Ⅷ因子相关抗原、抗CD45白细胞共同抗原的免疫细胞化学染色，以及荧光显微镜观察细胞角蛋白的细胞间接免疫荧光染色等三方面进行细胞鉴定：Ad5-EGFP转染脑膜间皮细胞,通过荧光显微镜观察法和流式细胞仪检测法确定重组腺病毒转染细胞的MOI值；通过ELISA法检测Ad-HGF转染细胞的培养上清液中HGF的表达情况；通过MTT法检测HGF对细胞增殖能力的影响；通过细胞划痕实验和Transwells法检测HGF对细胞迁移能力的影响。
参考文献
[1]Meningeal and choroid plexus cells—Novel drug targets for CNS disorders[J].Mike Dragunow.Brain Research.2013
[2]Thrombin-induced TGF-β1 pathway:A cause of communicating hydrocephaluspost subarachnoid hemorrhage[J].Tong Li,Peng Zhang,Bin Yuan,Dongliang Zhao,Yueqin Chen,Xinzhong Zhang.International Journal of Molecular Medicine.2013(3)
[3]Fluorescence of a Histidine-Modified Enhanced Green Fluorescent Protein(EGFP)Effectively Quenched by Copper(II)Ions[J].Emese-éva Bálint,Judit Petres,Mária Szabó,Csongor-Kálmán Orbán,LászlóSzilágyi,Beátaábrahám.Journal of Fluorescence.2013(2)
[4]The transcriptome of cerebral ischemia[J].Reyna L.VanGilder,Jason D.Huber,Charles L.Rosen,Taura L.Barr.Brain Research Bulletin.2012(4)
[5]魏丹.Ad-HGF转染大鼠脑膜间皮细胞的效率与细胞活性研究[D].新乡医学院,2013.