背景及概述[1]
2，4-二硝基苯肼(DNPH)比色法是测定蛋白质羰基含量的经典方法，被氧化后的蛋白质羰基含量增多，羰基可与2，4-二硝基苯肼反应生成2，4-二硝基苯腙，2，4-二硝基苯腙为红棕色的沉淀，将沉淀用盐酸胍溶解后即可在分光光度计上读取370nm下的吸光度值，从而测定蛋白质的羰基含量。2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH是一种化学物质，分子式是C15H14N4O4，可用作医药合成中间体。如果吸入2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH，请将患者移到新鲜空气处；如果皮肤接触，应脱去污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤，如有不适感，就医；如果眼晴接触，应分开眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗，并立即就医；如果食入，立即漱口，禁止催吐，应立即就医。
DNPH与羰基化合物（例如2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH）的高度选择性反应可检测衍生的羰基化合物。其次，仅在氨基硝基芳族化合物的正离子化中才能观察到用于触发MS3断裂的羟基自由基的特征损失，从而可以选择性检测和断裂DNPH衍生的羰基。最后，由于衍生剂如2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH的出现，特定碎片离子的出现将可能的假阳性识别减至最少。有研究用DNPH与羰基化合物（例如2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH）表征由特定暴露产生的有毒和遗传毒性的羰基化合物，并用于监测羰基化合物的内源性形成，例如衍生自与脂质过氧化和氧化应激相关的炎症过程的羰基化合物。
主要参考资料
[1] A High Resolution/Accurate Mass (HRAM) Data-Dependent MS3 Neutral Loss Screening, Classification, and Relative Quantitation Methodology for Carbonyl Compounds in Saliva