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促肾上腺皮质激素的检测方法

发布日期:2020/1/11 10:20:20

概述[1]

促肾上腺皮质激素是一种由39个氨基酸组成的肽类激素,分子量约为4.5kD。促肾上腺皮质激素在垂体中产生,作用于肾上腺皮质,具有促进肾上腺皮质组织增生、皮质激素生成和分泌的作用。在临床上,促肾上腺皮质激素检测对于鉴别诊断肾上腺功能减退和分泌亢进很有价值。因此,出现了针对促肾上腺皮质激素测定的体外诊断试剂。

检测方法[1]

目前用于检测促肾上腺皮质激素的免疫分析方法主要有酶联免疫分析法和化学发光免疫分析法。酶联免疫分析法采用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记抗体,用于催化发光底物产生颜色变化,操作简单,但是标记物易失活,发光底物需要避光,试剂的检测灵敏度较低,导致测试结果不准确。化学发光免疫分析法采用催化剂催化化学发光物质形成一种激发态中间体,当激发态中间体回到稳定的基态时,发出光子,具有操作简单,自动化程度高,检测速度快等优点。但是将抗体直接包被磁珠容易造成磁珠的凝集现象,导致试剂稳定性差,影响检测的结果的准确性。

应用[3]

促肾上腺皮质激素(Corticotropin,促肾上腺皮质激素)是由脑垂前叶分泌的激素。它具有刺激肾上腺皮质发育和机能的作用。主要作用于肾上腺皮质束状带,刺激糖皮质类固醇的分泌。促肾上腺皮质激素还具有通过肾上腺皮质来调节抗体生成作用,与生长素起相反的作用。

制备[2]

现有提取促肾上腺皮质激素的方法是丙酮盐酸法和酸提法,丙酮盐酸法优点是收率高,缺点是有机溶剂用量较大,产品纯度较低。

一种促肾上腺皮质激素制备方法,将新鲜脑垂体经丙酮脱水脱脂并烘干至水分低于5%后,粉碎过40目筛。将粉重9倍的无水乙醇预热至55℃后加入垂体粉中,混合均匀后再加入粉重3.6倍的0.6mol/L盐酸溶液,连续搅拌提取30分钟。料液降温至-10℃,离心得上清液,加入上清液体积3倍量无水乙醇,用氢氧化钠溶液调节pH4.4,离心得上清液,用氢氧化钠溶液调节pH4.6,离心得促肾上腺皮质激素沉淀。冻干沉淀所得样品重量为垂体粉重量的2.9%,样品中促肾上腺皮质激素含量为4.1%。

主要参考资料

[1] 聂红, & 沈映君. (2002). 白芷总挥发油对疼痛模型大鼠的β—内啡肽、促肾上腺皮质激素、一氧化氮及前阿黑皮素的影响. 中国中药杂志, 27(9), 690-693.

[2] 沈雁文, & 王华. (2013). 促肾上腺皮质激素与中枢神经系统发育研究进展. 中国实用儿科杂志(3), 234-238.

[3] 刘雁峰, & 王天芳. (2000). 复合应激因素致大鼠促肾上腺皮质激素和皮质酮含量变化的研究. 中华中医药杂志(1).

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