背景[1-3]
尼氏染色液(焦油紫法)选用优质焦油紫（Cresyl violet）作为原料，既可以染尼氏小体也可以染细胞核，染色后呈蓝紫色，可清晰的显示脑或脊髓等的基本神经结构。染色液染色鲜明而稳定、操作简便、适用范围广，可以用于石蜡或冰冻切片以及细胞样品的尼氏小体、神经元等的染色。尼氏体或称尼氏小体（Nissl body）是胞浆内的一种三角形或椭圆形小块状的嗜碱性物质，能被碱性染料染成蓝紫色。
尼氏小体广泛见于各种神经元，但其形状大小和数量分布则各有差别。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。尼氏染色后尼氏小体呈斑驳状，核周围尼氏小体较大，近边缘处较小而细长。如在生理情况下，尼氏小体大而数量多，反应神经细胞合成蛋白质的功能较强；在神经元受损时，尼氏小体的数量可减少至消失。尼氏体或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。通过焦油紫染色，能够很好地显示尼氏体的变化。
应用[4][5]
用于应激对大鼠中脑多巴胺能神经细胞的影响及机制探讨
黑质(substantia nigra,SN)和腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)是中脑两个重要的多巴胺能神经核团,以往研究提示多巴胺能神经细胞可能在应激反应中发挥作用,但详细的作用机制尚不清楚,因此本研究旨在系统观察不同时程应激大鼠中脑黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的病理性改变,探明多巴胺能神经细胞特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)及内质网应激相关蛋白的表达变化,为应激性损伤的机制研究提供病理形态学依据。
方法:1本实验将60只SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠,体重200±20g,随机分组,每组6只,分为1天、3天、7天、14天和21天组及各相应时间点的对照组。实验组采用束缚加冰水游泳应激模型(RS+IS应激模型),即给予大鼠每天6小时(8:00-14:00)仰卧位固定的束缚处理,同时禁食水,束缚完毕后,立即进行5分钟冰水游泳。在实验组处理期间,各对照组禁食水并自由活动于笼中,其余时间所有大鼠自由进食水,各实验组及相应对照组大鼠于实验结束第二天处死,取脑组织固定、脱水、透明、包埋及连续性切片,待做各种组织病理学染色使用。黑质和腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化黑质神经细胞尼氏体变化对照组黑质神经细胞结构清晰,尼氏体均匀分布于胞浆内。与对照组相比,应激1天组无明显变化,3天组部分神经细胞水肿,尼氏体结构不清。
参考文献
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[2]The hidden side of Parkinson’s disease:studying pain,anxiety and depression in animal models[J].Fanny Faivre,Anil Joshi,Erwan Bezard,Michel Barrot.Neuroscience and Biobehavioral Reviews.2018
[3]The antimicrobial protection hypothesis of Alzheimer’s disease[J].Robert D.Moir,Richard Lathe,Rudolph E.Tanzi.Alzheimer’s&Dementia:The Journal of the Alzhei.2018
[4]Endoplasmic reticulum stress in pulmonary fibrosis[J].Ankita Burman,Harikrishna Tanjore,Timothy S.Blackwell.Matrix Biology.2018
[5]牛世霸.应激对大鼠中脑多巴胺能神经细胞的影响及机制探讨[D].河北医科大学,2019.