背景[1-3]
牛血清白蛋白,低IGG,干细胞级别适用于RIA和ELISA检测中用作稀释液和封闭剂。也可用于干细胞培养、杂交瘤细胞培养。牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/1000ml），分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。
白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 Da，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。
牛血清白蛋白一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保护”或“载体”作用，不少酶类添加BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可实现重复切割。在37℃，酶切反应超过1h时，BSA可以使酶更加稳定，因为在不含BSA的反应缓冲液中，许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
应用[4][5]
用于光谱法研究格列齐特、格列喹酮、硫酸粘杆菌素与牛血清白蛋白间的相互作用研究
以牛血清白蛋白(BSA)的光谱为检测对象,采用荧光猝灭法和同步荧光法,分别研究了298 K、310 K和318 K三个温度时,BSA与格列齐特(Glic)的相互结合机制。
实验结果说明:BSA-Glic体系是形成新物质的静态猝灭并不是碰撞引起的动态猝灭;结合常数均在104数量级;Glic在BSA上只有一个高亲和力的结合位点;BSA与Glic的结合位置在BSA的疏水亚结构域IIA;BSA-Glic之间是通过静电作用力结合;Hill系数约等于1,表现为零协同作用;
药物Glic(1.0×10-7~1.0×10-3 mol/L)血浆蛋白结合率相近。两种方法所得的结论相同,说明同步荧光光谱法不仅可以反映出药物对蛋白质微环境的改变,所得的数据也可以用来推断蛋白质-药物体系的相互作用机制。
以药物光谱为检测对象,采用共振光散射法和紫外吸收法分别研究了三个温度下格列齐特(Glic)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用机理。实验结果表明:BSA与Glic之间是形成新结合物的静态猝灭。利用两种方法所得实验数据计算了体系的猝灭常数、热力学参数、Hill系数等一系列参数。
将这些参数与以蛋白质光谱变化为检测对象的传统荧光猝灭法相比较,发现共振光散射法与紫外吸收法的结合常数明显大于传统荧光光谱法的结果,表明以药物光谱变化为检测对象的方法能更准确、合理地提供体系的结合信息。
参考文献
[1]Circular Dichroism of Amino Acids:Following the Structural Formation of Phenylalanine[J].Nadav Amdursky,Molly M.Stevens.ChemPhysChem.2015(13)
[2]Comparative Studies on the Interaction of Aspirin with Bovine Serum Albumin by Fluorescence Quenching Spectroscopy and Synchronous Fluorescence Spectroscopy[J].Li-Hui Zhang,Bao-Sheng Liu,Zhi-Yun Li,Ying Guo.Spectroscopy Letters.2015(6)
[3]Interaction of erucic acid with bovine serum albumin using a multi-spectroscopic method and molecular docking technique[J].Yang Shu,Weiwei Xue,Xiaoying Xu,Zhimin Jia,Xiaojun Yao,Shuwen Liu,Lihong Liu.Food Chemistry.2015
[4]Spectroscopic analyses and studies on respective interaction of cyanuric acid and uric acid with bovine serum albumin and melamine[J].Dandan Chen,Qiong Wu,Jun Wang,Qi Wang,Heng Qiao.Spectrochimica Acta Part A:Molecular and Biomole.2015
[5]张秋菊.光谱法研究格列齐特、格列喹酮、硫酸粘杆菌素与牛血清白蛋白间的相互作用[D].河北大学,2016.