背景[1-3]
乳糖胆盐发酵培养基颗粒是用于大肠菌群，粪大肠菌群，大肠杆菌的测定（GB标准）的固体颗粒培养基。乳糖胆盐发酵培养基颗粒用溴甲酚紫作指示剂，该指示剂中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，大肠杆菌能分解乳糖产酸产气，因此乳糖胆盐发酵管里溶液颜色变成黄色和产生气泡。胆盐的作用：胆盐对很多杂菌有抑制作用，但是对大肠杆菌不造成影响。成分（g/L）蛋白胨20.0g；牛胆盐5.0g；乳糖10.0g；溴甲酚紫0.01g，PH值7.4±0.2。
检验原理：
蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；牛胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；溴甲酚紫是pH指示剂，酸性呈黄色，碱性呈紫色。
使用方法：
1、称取本品35克(单料)或70克(双料)加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装于带有小倒管的试管中，培养基每管10mL，115℃高压灭菌15min。
2、样品的处理及稀释。
3、(1)食品：取1mL稀释液，加入到含有10mL乳糖胆盐培养基的试管中，根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选取三个合适的稀释度每个稀释度接种三管。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发酵管，1mL及1mL以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。(2)一次性使用卫生用品：取样液5mL接种50mL单料乳糖胆盐发酵管。
4、将试管放入到培养箱中36±1℃培养24h。
5、观察结果。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则要进行分离、证实试验。
应用[4][5]
用于乳品中大肠菌群快速检测研究
以国标法中乳糖胆盐发酵培养基为基本营养成分,分别研究构建了检测片法和细胞培养瓶剂法,并对模拟条件下的可逆性损伤大肠杆菌进行了复苏实验研究。为探索适合乳品中大肠菌群快速检测的方法和提高检出率打下研究基础。
研究了一种用于快速检测大肠菌群的细胞培养瓶剂法,即以国标法中的乳糖胆盐发酵培养基为营养成分,经浓缩、干燥后制成快速检测瓶剂,以遴选的3.5 mol/LNaOH配制的百里香酚酞溶液作为产气指示剂,并将其制成1×1cm规格产气指示试纸。
样品滴加细胞培养瓶内,培养24 h,依据培养瓶盖上产气指示试纸颜色变化及瓶内溶液颜色变化,确定可疑阳性样品,并对其进行氧化酶实验及镜检,验证大肠菌群的存在性。实验对细胞培养瓶法进行了大肠菌群的重复性及实际样品检测,并与国标法进行了比较。
结果显示,细胞培养瓶法与国标法所测结果符合率达96%,样品检测报告时间只需24 h,两种方法所测结果在统计学上无显著性差异(P>0.05)。细胞培养瓶剂法表现出明显的技术优势,利于基层监测机构和生产企业对食品中大肠菌群的快速检测。
参考文献
[1]Enzymatic substrates in microbiology[J].Sylvain Orenga,Arthur L.James,Mohammed Manafi,John D.Perry,David H.Pincus.Journal of Microbiological Methods.2009(2)
[2]Analytical limits of fourβ-glucuronidase andβ-galactosidase-based commercial culture methods used to detect Escherichia coli and total coliforms[J].Journal of Microbiological Methods.2008(3)
[3]A simple bioluminescence procedure for early warning detection of coliform bacteria in drinking water[J].World Journal of Microbiology and Biotechnology.2008(10)
[4]Growth and survival of Escherichia coli O157:H7 during the manufacture and ripening of raw goat milk lactic cheeses[J].C.Vernozy-Rozand,C.Mazuy-Cruchaudet,C.Bavai,M.P.Montet,V.Bonin,A.Dernburg,Y.Richard.International Journal of Food Microbiology.2005(1)
[5]魏斌.乳品中大肠菌群快速检测研究[D].南昌大学,2011.