正常人AB血清的应用

2020/10/26 9:14:00

背景及概述[1]

人血清血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。正常人AB血清来自于AB血型健康男性供体,该血清是由AB血浆经去纤维蛋白得到的,所有供体病毒标志物检测为阴性。

应用[2-3]

应用一:

正常人AB血清用于DC细胞的体外培养:用肝素抗凝管采集患者自体的外周血40-50ml,通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC),PBMC在含5-10%灭活的正常人AB血清的l640培养基里培养30-90min,吸去悬浮细胞,贴壁细胞用含800-2000U/mlGM/CSF、500-1000U/mlIL-4、5%正常人AB血清的1640培养基中在6孔培养扳中培养5-7天。可见悬浮的有树突形状的成熟DC细胞。

应用二:

正常人AB血清用于间充质干细胞的制备和培养:

a)使用无菌手动,或自动方法处理脐带或胎盘组织至小于1mm大小

b)进一步可使用无菌组织研磨设施处理组织至更小的颗粒

c)室温离心250g5分钟,弃去上清,收集细胞,用DMEM清洗。再次离心和清洗。

d)常规胶原酶,胰蛋白酶处理组织。

e)常规收集储存代和培养后收集第二,三代间充质干细胞。

f)培养采用Dulbecco’smodifiedeagle’smedium(DMEM,Gibco,USA),10%自身血清或正常人AB血清,1%glutamine(Gibco,USA)及无血清培养液。

参考文献

[1]正常人AB血清说明书

[2]CN201610859460.9一种乳腺癌特异性CTLs的制备方法

[3]CN200810052286.2临床治疗用脐带胎盘间充质干细胞的制备储存和应用

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