人参皂甙Rg3的提取方法

2021/11/12 10:42:44

背景及概述[1]

人参皂甙Rg3有S型和R型两种旋光异构体,分别具有不同的生理和生物活性,其中人参皂甙Rg3(S)水溶性和生物活性要高于异构体Rg3(R)。人参皂甙Rg3(S)只存在于红参中,且含量很低,在生参和白参中未检测到人参皂甙Rg3(S),人参皂苷Rg3(S)在体内外具有抗肿瘤作用、降低血压、神经保护作用、保护肝脏作用和抑制血管痉挛等多种功效。除此之外,Rg3(S)还是人参皂甙Rh2前体,而Rh2具有较强抗癌作用,2000年,国内已经将人参皂甙Rg3(S)作为抗癌药物应用于临床治疗,其药理学机制是抑制肿瘤细胞侵入和转移。

提取方法[1-2]

报道一、

(1)称取80%人参/西洋参/三七茎叶总皂甙200g,并加入400mL乙酸乙酯,常温搅拌12h,抽滤,滤饼干燥得,混合粉末;

(2)称取第二混合粉末20g,加入300mL水,加热至100℃,搅拌反应20min,滴加体积比为10%盐酸水溶液300mL,滴加完毕,加入600mL乙酸乙酯和60mL水,搅拌10min,抽滤,得到滤饼和滤液,滤液用200mL饱和碳酸钠水溶液洗三次,乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥,旋干;滤饼用100乙酸乙酯和500mL石油醚打浆,抽滤,滤饼干燥得第二固体粉末4.7g;

(3)取0.05ml CAP、0.3ml十二醇、40ml苯和0.1ml 4-VP混匀超声4h后,加入1mlEGDMA和8mg AIBN,混匀超声10min后,得到混合物,将混合物用100mL的进样针取移取至一端封口的移液枪枪头内,枪头用保鲜膜及硅胶封口后于60℃反应24小时后取出,除去保鲜膜及硅胶,小心剪开末端的封口,用甲醇将模板分子洗尽后,得到印迹聚合物整体柱备用;

(4)将第二固体粉末粗品配成20%质量比的水溶液,使用印迹聚合物整体柱分离纯化,洗脱剂使用纯化水,洗脱剂的收集采用等份发自动收集,洗脱顺序依次为Rg3,Rg5,Rh1,Rh2,Rh3,。皂苷元被柱体吸附,整体柱使用完以后使用95%乙醇继续洗脱,把皂苷元洗脱下来,收率达20.1%,Rg3的含量可达98%。

报道二、

(1)提取:将1800kg人参根须预处理,以250kg/h速度投入多功能回流提取罐,加入8(V/M)倍量70%(V/V)乙醇,80℃高温回流提取2小时,提取两次,合并得到提取液;本步骤中人参根须的预处理方法为:在8-10℃,阴凉通风,风速2-3m/s,以原木网孔板平铺1-2cm 厚,阴干至平均含水率30-50%,

(2)提取液浓缩:将过滤后的提取液打入外循环浓缩罐,减压浓缩至浓缩终点,温度设定为60℃,真空度≥-0.06Mpa,浓缩终点为比重1.05-1.10,得浓缩液I;

(3)树脂吸附:将步骤(2)得到的浓缩液I上大孔吸附树脂柱吸附,上柱量按树脂:生药=1:0.5,柱流速为10L/分;加入乙醇洗脱,待流下液至颜色变为黄色时开始收集解析液,收集至无颜色为止;

(4)解析液浓缩:将解析液在60℃,真空度≥-0.06Mpa环境下减压浓缩至浓缩比重1.10-1.15,得浓缩液II;

(5)弱酸水解:将浓缩液II泵入15(V/M)倍量含有保护剂的酸性醇水溶液中,该酸性醇水溶液为含盐酸浓度2mol/L,含5g/L抗坏血酸,浓度为45%的甲醇水溶液,在25℃下,氮气保护条件下,进行搅拌水解2天;

(6)精制萃取:用2mol/L碳酸氢钠中和水解反应液,减压蒸出甲醇,用步骤(5)终点反应液1倍量(M/M)的乙酸乙酯反复萃取提纯,并将萃取相水洗,将萃取得到的料液层(有机相)在50℃高温常压(1atm)下浓缩至无溶剂,然后再在真空度≥-0.06Mpa,70℃高温下浓缩至浓缩比重1.10-1.15,得浓缩液III;

(7)喷雾干燥:控制进风温度为185℃,出风温度为85℃,进浓缩液III,喷雾,得372.3kg人参干燥提取物,其中Rg3含量为13.9%。

参考文献

[1] [中国发明] CN201910856528.1 一种人参皂甙Rg3的提取方法

[2] [中国发明] CN201410385464.9 一种从人参中提取制备人参皂甙 Rg3 的方法

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