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硫酸软骨素关键质量控制及结构指标:二糖组成(II)

发布日期:2021/11/30 10:41:05

硫酸软骨素(Chondroitin sulfate, CS)根据二糖单元硫酸化位点的不同,可以分为CS-A、CS-B、CS-C、CS-D、CS-E、CS-F、CS-H、CS-K、CS-L、CS-M等11种[1]。不同来源的CS在二糖组成上具有明显的种属和组织差异性。陆地动物牛、猪、鸡等软骨来源的CS主要以CS-A为主。海洋动物也是CS的重要来源之一,CS-A的主要来源为鲸鱼,CS-C的主要来源为鲨鱼,CS-D可以从鱼类、鲨鱼和鱿鱼中得到,CS-E主要为鱿鱼来源。

CS的二糖组成分析是其质量控制以及溯源的重要手段[2]。目前,最常用的分析方法是酶解-液相法(标准品对比法),即采用能够特异性降解CS的硫酸软骨素酶ABC对供试品进行酶解,获得二糖片段;将供试品酶解液和二糖标准品注入液相色谱仪,通过保留时间的比对进行定性/定量分析。目前,商品化的硫酸软骨素二糖标准品有八种,即△Di-0S、△Di-4S、△Di-6S、△Di-2S、△Di-4,6diS、△Di-2,4diS、△Di-2,6diS、△Di-2,4,6triS,其结构如下表所述。这八种二糖标准品常以单标或混标的形式进行包装销售。

采用阴离子交换色谱柱(SAX柱),各二糖标准品的出峰顺序为△Di-0S、△Di-6S、△Di-4S、△Di-2,6diS、△Di-4,6diS、△Di-2,4S、△Di-2,4,6triS。如下图所示,在对不同来源CS供试品分析中,通过供试品与标准品色谱峰保留时间对比,可以得出鲨鱼来源CS含有的二糖单元为△Di-6S、△Di-4S和△Di-2,6diS,猪来源CS含有的二糖单元为△Di-6S和△Di-4S。海洋来源CS的△Di-6S含量多于△Di-4S,而陆地来源CS的△Di-6S含量少于△Di-4S。基于二糖片段组成以及相对比例,可快速推断供试品的来源信息[2]。

参考文献

[1] LAUDER R M. Chondroitin sulphate: A complex molecule with potential impacts on a wide range of biological systems[J]. Compl Ther Med, 2009, 17: 56-62.

[2] 侯美曼. 硫酸软骨素质量标准研究[D]. 中国食品药品检定研究院, 2017.

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