黄酮类化合物存在于许多植物（如可食用的水果、蔬菜和中药材）中，是维持生命的重要化合物之一。黄酮类化合物具有多个与芳香苯环相结合的羟基结构，因此它们具有螯合过渡金属离子、清除自由基、与酶相互作用的能力，已被证实为一种有效的抗氧化剂。此外，其由于具有广泛的用途优势，在科学研究领域中，已经引起了广泛的关注[1]。
花旗松素，又称3,5,7,3′,4′-五羟基二氢黄酮或二氢槲皮素，是维生素P家族的一员[2]，首次在花旗松Pseudotsuga menziesii (Mirb.) Franco树皮中提取得到[3]。研究表明花旗松素能以反式和顺式2种形式存在，易溶于水-醇溶液和极性溶剂中。常温下，花旗松素一般呈现为淡黄色，而在50%乙醇溶液环境下呈针状结晶样[4]。花旗松素具有4个酚羟基（Ar-OH）和1个羟基的特殊分子结构，成为目前为止发现的天然强效抗氧化剂。花旗松素的应用领域相当广泛，如食品、药品、化妆品、农药等产业，常被用作食品添加剂及重要的膳食补充剂之一，是具有抗氧化功能食品的首选材料[5]。当然，受到研究者格外青睐的还有花旗松素在医药行业的应用和继续开发的价值。因此，本文主要对花旗松素的植物来源、提取方法、药理作用及其作用机制进行综述，以期为进一步开发花旗松素带来更多的思考和可能性的探究。
1 植物来源以及提取方法
花旗松素存在于诸多植物中，如松科落叶松属植物长白落叶松Larix olgensis Henry var. koreana Nakai、菊科水飞蓟属水飞蓟Silybum marianum L.、蓼科植物红蓼Polygonum orientale L.、百合科葱属多年生的草本植物洋葱Allium cepa L.、百合科菝葜属光叶菝葜Smilax glabra Roxb.、胡桃科黄杞属黄芪Engelhardtia roxburghiana Wall.。已有文献报道的提取和纯化方法也各不相同。
1.1 落叶松
在我国东北地区生长着大量的长白落叶松，松科中的花旗松素含量较高，因此有研究人员考虑用资源丰富的长白落叶松提取花旗松素。张卫鹏等[6]发现花旗松素在长白落叶松根部不同部位的含量不同，以根髓心和心材的含量最高，树皮中含量最低（以A林场为例：花旗松素在根髓心和心材中的质量分数分别为67.62、69.06mg/g，边材为12.98 mg/g，树皮则为8.62 mg/g）。此外，11个检测林场中长白落叶松的花旗松素含量也不尽相同，以J林场的长白落叶松根部花旗松素质量分数最高，为55.81 mg/g，而D林场的最低，只有7.07mg/g，结果表明生长地区和选择部位的不同，会导致长白落叶松中的花旗松素含量有较大区别，提示要合理运用知识提取长白落叶松中的花旗松素。刘婷婷等[7]先使用80%乙醇溶液提取兴安落叶松中的花旗松素，再使用去离子水提取，然后以含0.5mg/mL花旗松素的上样液，体积流量为4 BV/h，上样体积为169mL，床层的径高比为1/10的条件进行大孔树脂洗脱，再将40 mg粗提物溶解在35%甲醇水溶液中，经过制备的色谱洗脱，可得质量分数为98.02%的花旗松素。付警辉等[8]使用80%乙醇溶液进行2次加热回流提取长白落叶松，再经聚酰胺树脂洗脱、重结晶等纯化操作后得到质量分数高达92%的花旗松素。说明使用传统方法提取落叶松中的花旗松素时，应考虑进行洗脱及其他的纯化步骤，扩大花旗松素的提取纯度。
现代研究表明，多种水解酶与细胞壁作用后，会破坏其结构完整性，从而促进黄酮苷元类成分的释放，此法具有效率高、易于操作等优点[9]。Wang等[10]采用新型的酶培育水提取法优化从兴安落叶松木屑中提取花旗松素的方法，此法中加入纤维素酶0.5 mg/mL和果胶酶0.5 mg/mL，调节pH值为5.0，32 ℃下孵育兴安落叶松18 h，之后在50 ℃水中提取花旗松素和总黄酮30 min，花旗松素的质量分数从原来的1.06 mg/g提高到了1.35 mg/g。应用闪式提取器可以将所需的有效成分从植物中大量溶出，具有快速、不需加热、节约时间等特点。柴婧等[11]使用闪式提取方法，在61%乙醇溶液、加酶量3.5mg/g、液料比104∶1 mL/g、提取时间2 min条件下，得到23.22 mg/g花旗松素。综上所述，落叶松是我国宝贵的植物资源，其中花旗松素含量高，应充分利用此资源，研究人员可运用科学知识对提取手段和纯化步骤进行优化，以增大花旗松素的提取得率。
1.2 水飞蓟
水飞蓟为菊科水飞蓟属植物，在我国多地有分布，其中黄酮类成分特别是花旗松素含量较多。刘佳鑫等[12]预先脱脂水飞蓟后，在45 ℃下采用75%甲醇溶液对水飞蓟果实超声提取1 h，45 ℃下用75%甲醇溶液对水飞蓟果皮直接超声提取1 h，45 ℃下用甲醇对水飞蓟提取物直接超声提取20 min，分别测定出样品中花旗松素的质量分数为0.13%、0.22%、1.20%。结果表明，水飞蓟中花旗松素的含量较低，如需提取花旗松素，可对提取工艺再进一步的优化。
1.3 红蓼
荭草即为蓼科植物红蓼的全草，其果实又称水红花子。花旗松素是衡量荭草药材质量的重要指标，始载于《中国药典》1977年版：水红花子含花旗松素不得少于0.15%[13]。刘刚等[14]通过乙醇回流法提取水红花子中的花旗松素，单因素实验结果表明，花旗松素提取的工艺条件为63%乙醇溶液、提取时间3.4 h、料液比1∶19（m∶V）、提取温度95℃、提取2次，得到花旗松素的提取量为7.2 mg/g。刘刚等[15]用此方法对荭草中提取得到的花旗松素进行纯化，发现AB-8树脂对荭草中花旗松素的吸附和解吸性能较好，确定工艺为上柱液（质量浓度1mg/mL、体积流量1 mL/min）、洗脱液（75%乙醇溶液、体积流量1 mL/min、用量100 mL）。此法得到花旗松素的回收率（54.18%）和质量分数（74.51%）都令人满意，大概得率为0.75 mg/mL。其他研究者将25 g水红花子粉末用50倍量水浸泡1 h后回流40 min，提取2次，合并、浓缩，再溶于无水乙醇溶液中得粗提取液。对水红花子粗提取物进行聚丙烯柱固相分离，洗脱剂为甲醇-醋酸（6∶4），多次重复操作，花旗松素的提取率达到90%以上[16]。而佟苗苗等[17]确认从水红花子中提取花旗松素的工艺条件：20倍量66%乙醇溶液，提取93 min，提取1次，得到0.23%花旗松素。丑静等[18]发现提取水红花子中花旗松素的提取工艺为6倍量60%乙醇溶液回流提取3次，每次2 h，可得到花旗松素6.24 mg/g。综合可知，水红花子和荭草的提取多采用溶剂回流提取法，经过不同的纯化手段均可得到花旗松素。
1.4 洋葱和土茯苓
洋葱鳞茎部分是动物膳食中黄酮类化合物丰富的来源之一，在整体黄酮类化合物摄入量中占很大比例。结合薄层色谱法（thin-layer chromatography, TLC）、高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）和2D-核磁共振（nuclear magnetic resonance，NMR）技术，洋葱鲜质量中可以鉴定出花旗松素98.1 mg/kg[19]。
此外，土茯苓始载于《本草经集注》，言“昔禹行山乏食，采此以充粮”。《本草纲目》记载土茯苓气平，味苦而淡，为阳明本药，能健脾胃、去风湿，脾胃健则营卫从，显示出很好的药用价值，至今一直作为药食同源的产品进行应用。采用正交试验设计优化土茯苓饮片中总黄酮的提取工艺为料液比1∶50，50%乙醇水溶液，超声提取60 min；再采用反相高效液相色谱（reversed phase -HPLC，RP-HPLC）法进行纯化，发现不同产地的花旗松素质量分数为0.008 69%～0.069 96%[20]。王敏等[21]用70%乙醇水溶液加热回流提取土茯苓3次（第1次提取2.5 h，第2、3次各提取2 h），用HP-20吸附树脂柱梯度洗脱（水及30%、60%、95%乙醇），鉴定出此总提取物中含有花旗松素，说明HP-20吸附树脂可用于黄酮类成分的富集和纯化，也提示可选用HP-20吸附树脂来纯化花旗松素。
1.5 黄杞叶
陆弘等[22]用95%乙醇溶液回流提取黄杞叶4 h，共3次，再溶于1 L甲醇，石油醚萃取，得230g浸膏，再用醋酸乙酯-甲醇-水梯度洗脱，得到的组分用硅胶柱色谱、Sephadex LH20柱色谱和HPLC分离后得到24 mg花旗松素。孙彤等[23]和龚俊强等[24]先用乙醇回流提取，再经过硅胶等多种色谱设备多次洗脱可以得到较高得率的花旗松素。
综上所述，花旗松素是二氢黄酮类化合物，由于其水溶性差，所以传统的植物来源提取方法多采用有机溶剂（乙醇）加热进行提取，然后经萃取、洗脱等程序最终获得花旗松素。但传统的提取工艺有着不可避免的弊端，如过多的有机溶剂带来的毒性、杂质多、无法实现高效率和大规模从植物中提取花旗松素，因此，仍需开发更高效和更经济的提取方法。此外，花旗松素的提取工艺仍需确定相关标准，监管有效的实施监管体制，确保提取物花旗松素的产品质量。已有文献报道的提取和纯化方法见表1。
2 药理作用
研究表明花旗松素在抗氧化、抗炎、肝脏保护、抗肿瘤、调血脂、抗血管形成、抗老年痴呆、抗菌、和治疗寄生虫等方面有着突出的药用价值。
2.1 抗氧化
Kolhir等[25]发现花旗松素100、300 mg/kg的抗氧化作用分别是槲皮素的3.4、4.9倍，这也是首次关于花旗松素抗氧化作用的报道。此后，又有研究发现花旗松素可以通过减少细胞内线粒体产生自由基这一机制进而表现出抗氧化作用[26]。花旗松素治疗四氯化碳（CCl4）致肝炎大鼠时，大鼠血清和肝脏中硫代巴比妥酸反应物（thiobarbituricacid reactive substances，TBARS）的含量比对照组降低了1.5倍以上，血清的抗氧化活性升高了至少1.8倍[27]。Topal等[28]发现花旗松素30 μg/mL对亚油酸乳液过氧化作用的抑制率为81.02%，此外，其对N,N-二甲基-对苯二胺、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐、超氧自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基具有清除和还原作用，能与Fe2+发生螯合反应。付警辉等[8]对比研究了2种不同来源（长白落叶松和兴安落叶松）花旗松素对酪氨酸酶的抑制作用，结果表明2种来源花旗松素对酪氨酸酶均有抑制作用，而长白落叶松中低浓度、高纯度的花旗松素对酪氨酸酶的抑制作用最强，说明花旗松素的浓度和纯度对抑制酪氨酸酶有重要关系。以上结果表明，花旗松素对产生的自由基、氧化反应物有清除作用，对酶类物质的活性表现出了良好的抑制能力。另有研究发现，花旗松素能减轻H2O2诱导的人视网膜色素上皮ARPE-19细胞的氧化损伤[29]，以及减轻大鼠皮层细胞的氧化性神经损伤而表现出神经保护作用[30]。以上结果说明花旗松素可以通过抑制氧化反应进而保护细胞不受损伤。
花旗松素的抗氧化能力与其结构有着密不可分的关系。Topal等[28]发现基于花旗松素多酚的结构，其抗氧化能力、清除自由基能力及与金属螯合的能力表现突出。另有研究表明，在乙醇酸溶液中，2个花旗松素可通过A环（C-6和C-8）的羧甲基桥形成1个二聚体，此二聚体表现出比花旗松素更有效的清除活性氧（reactiveoxygen species，ROS）的作用，具有与酚羟基数目成正比的铁离子还原速度；但因二聚体会更快达到还原的饱和浓度，其还原总铁量的能力弱于花旗松素[31]。Salah等[32]指出花旗松素A环的5位、7位-OH可以清除自由基，而B环的邻二羟基则提供了结构稳定的作用。Chobot等[33]证实花旗松素的抗氧化活性是由于其有电化学氧化还原的结构，尤其是A环上的-OH。花旗松素与β-环糊精复合物具有更强的抗氧化活性，说明花旗松素可以进行剂型改造，扩大其生物利用度和实用性[34]。多种研究结果表明，花旗松素因结构的特殊性进而表现出强大的抗氧化作用。
2.2 抗炎
Muramatsu等[35]研究表明日本落叶松的抗炎活性主要来源于花旗松素这一主要活性成分，花旗松素抑制人单核白血病THP-1细胞生长的作用及诱导白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）mRNA表达能力均较弱于槲皮素和木犀草素，其抗糖基化作用与槲皮素和木犀草素相当，表明花旗松素不具有细胞毒性和炎症诱导活性，却有着较强的抗糖基化活性等优势。
此外，花旗松素对炎症相关的酶有较强的调节作用。研究表明花旗松素通过减少一部分激活的核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）活性，抑制大鼠脑损伤中的白细胞浸润和黏附分子的上调及炎性相关的前氧化酶诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）和环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）的表达，可显著减轻大鼠的脑缺血再灌注损伤的程度[36]。蔡华君等[37]通过二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀实验和4-氨基吡啶诱发的小鼠舔体研究，发现花旗松素能减轻小鼠的耳肿胀度及舔体次数，推测可能与抑制炎症相关蛋白和发生炎症相关的酶有关。王佳奇等[38]用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导RAW264.7细胞的炎症反应，同样验证了花旗松素的抗炎活力。花旗松素能减轻毒死蜱诱导的氧化应激及炎症反应，通过下磷酸化调腺苷酸活化蛋白激酶（phosphorylation adenosine monophosphate-activated protein kinase， p-AMPK）水平和激活核因子E2相关因子2（nuclear factor NF-E2-relatedfactor 2，Nrf2）/血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）信号通路实现神经保护作用[39]。
在体内外模型中，花旗松素可以抑制NF-κB、原癌基因c-Fos和有丝分裂原蛋白激酶（mitogen-activated proteinkinase，MAPKs）的启动，同时降低抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistantacid phosphatase，Trap）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase，MMP-9）、组织蛋白酶K（cathepsin K，CTSK）、活化T细胞核因子1蛋白（nuclear factor of activatedT-cells 1，Nfatc1）和破骨细胞分化因子（receptor activator ofNF-κB ligand，RANKL）等特异性破骨细胞表达的介质。花旗松素可抑制RANKL诱导的ROS的产生，抑制破骨细胞活性，降低TNF-α、IL-1β、IL-6的表达和切除卵巢小鼠体内的骨质流失[40]。另外，Hongqi等[41]在人骨髓来源的巨噬细胞中也得到同样的结论，证实花旗松素对骨组织成分吸收等活动表现出良好的药理作用。
近期研究表明，花旗松素可缓解金属离子引起的多种炎性反应。王帅[42]发现花旗松素可减轻六价铬在人脐静脉血管内皮HUVEC细胞中导致的氧化应激，并抑制黏附性反应。同时，花旗松素通过下调六价铬在THP-1细胞上已激活的NF-κB信号通路，从而缓解引发的炎症现象。
综上，花旗松素可通过不同的信号通路或炎症因子减轻多种刺激因子诱导的炎症反应及氧化应激活动。
2.3 肝脏保护
花旗松素是肝保护药物水飞蓟素的成分之一。研究表明，花旗松素在多种诱导因子造成的肝脏损伤中可表现出显著的肝保护作用。
2.3.1 化学性肝损伤 花旗松素通过脂质过氧化及甘油磷脂类物质代谢减轻CCl4诱导的急性肝损伤大鼠[43]。花旗松素0.25、0.5、1 mg/kg显著降低鱼藤酮所致的肝毒性大鼠的胆红素水平、谷氨酸氨基转移酶（glutamic oxalacetic transaminase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（glutamic-pyruvictransaminase，ALT）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）和γ谷氨酰转肽酶（gamma-glutamyltranspeptidase，GGT）的活性；而超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）、谷胱甘肽转移酶（glutathionetransferase，GST）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）水平和铁还原能力显著提高，肝保护作用与C环中2、3位C＝C的变化有关[44]。花旗松素对对乙酰氨基酚所致小鼠肝损伤表现出减轻作用，血清中AST、ALT、TNF-α和IL-6明显降低，Nrf2和SOD2 mRNA表达升高，凋亡因子B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）下调，Bcl-2和pro-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cystein-asparateprotease，Caspase）-3高表达，因此，花旗松素可通过减少炎症因子的表达、增强机体抗氧化能力、减少细胞凋亡等多途径发挥肝保护作用[45]。
2.3.2 免疫性肝损伤 在此研究中，花旗松素显著降低刀豆蛋白A诱导肝损伤模型小鼠血清中ALT和AST水平，同时降低肝脏中CD4+和CD8+T细胞的浸润程度，抑制炎症细胞因子、凋亡因子、Th细胞分化的关键性转录因子水平；并通过抑制Caspase的活化和降低NF-κB通路的磷酸化水平降低TNF-α/放线菌素D诱导的肝癌HepG2细胞凋亡[46]。
2.3.3 脂肪肝 吴梅等[47]发现花旗松素能改善并逆转高脂饲料联合过度酒精所致的脂肪蓄积状况，降低血浆和肝脏中三酰甘油（triglyceride，TG）的积累及升高的ALT、AST含量，下调胆固醇调节元件结合蛋白-1（sterolregulatory element binding protein-1，SREBP-1）表达，表明花旗松素对酒精性和非酒精性脂肪肝都具有一定的调控作用。郑今花[48]研究表明花旗松素通过抑制酒精诱导的P2嘌呤受体（P2P2X7 receptor，P2P2X7R）-Caspase-1-核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白3受体（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体的活化，及通过AMPK通路阻止脂肪合成与脂肪氧化过程来改善酒精性脂肪肝。
2.3.4 病毒性肝损伤 在一项水飞蓟素的研究中，与其他7种黄酮木脂素成分相比，半数抑制浓度（median inhibitory concentration，IC50）小于40µmol/L花旗松素具有明显的保肝作用；对人肝癌Huh7细胞耐受良好，阻断丙型肝炎病毒RNA复制的效果，并通过抑制NF-κB转录作用进而阻断JFH-1病毒诱导的氧化应激反应，但对T细胞增殖无活性作用[49]。
综上，花旗松素对肝损伤的改善作用大多通过减轻肝组织病理损害及抗氧化等路径实现，并下调肝损伤细胞凋亡相关基因而抑制肝损伤细胞凋亡，下调肝损伤炎性因子基因的表达，减少炎性介质的释放，调控相关信号通路的表达等从而减轻肝损伤程度，达到肝脏保护作用。
2.4 抗肿瘤
2.4.1 皮肤癌 Zhou等[50]发现花旗松素能抑制皮肤瘢痕细胞癌SSCC细胞系的增殖，剂量为20µmol/L时，抑制作用最强，花旗松素发挥的细胞凋亡及周期阻滞作用与MMP-2和MMP-9表达下调有关；且花旗松素100 µmol/L对非癌皮肤细胞无抑制作用，表明花旗松素具有较好的耐受性和安全性。
虚拟筛选结果发现花旗松素可与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）和磷脂肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）产生作用，三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）竞争和体外激酶检测数据显示，花旗松素与EGFR和PI3K在ATP结合袋竞争性结合从而抑制活性；在JB6 P+小鼠皮肤癌细胞中，花旗松素抑制紫外线B诱导的EGFR和蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/Akt）的磷酸化水平、COX-2和前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）表达水平及相关启动子的活性，在EGFR敲除的小鼠胚胎成纤维细胞中，花旗松素对紫外线诱导的MAPKs信号通路的磷酸化水平和抑制PGE2生成的作用均消失，表明EGFR是花旗松素产生作用的主要有效靶点。另外，花旗松素抑制EGFR诱导的细胞转化，并对紫外线诱导的皮肤癌变小鼠模型的背部皮肤肿瘤的发生、体积变化和多样性有明显的抑制作用，进一步分析显示，经花旗松素治疗的小鼠皮肤中EGFR和Akt的磷酸化显著降低[51]。Kuang等[52]在另一项研究中，发现花旗松素可抑制十四酰佛波乙酯诱导的JB6 P+细胞的集落形成，同时，诱导人肝癌HepG2-C8细胞的抗氧化反应荧光素酶的活性，并上调JB6 P+细胞中的Nrf2表达和下游靶点中HO-1、醌氧化还原酶1［NAD(P)H quinone dehydrogenase 1，NQO1］的水平。在亚硫酸氢盐基因组测序实验中，花旗松素降低Nrf2启动子中前15个甲基化岛（CpGs）位点的甲基化水平，抑制DNA甲基转移酶和组蛋白去乙酰化酶蛋白的表达水平。多项结果证实，花旗松素通过多种信号通路达到预防和治疗皮肤癌的目的。
2.4.2 肺癌 研究表明，花旗松素能以时间-剂量的关系，有效抑制人肺癌A549细胞的增殖，并诱导细胞凋亡，上调促凋亡蛋白Bax表达，下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达。此外，花旗松素抑制Akt的过表达促进p53的表达[53]。推测花旗松素对肺癌的药理作用与凋亡蛋白及Akt/p53信号通路有关，需进一步研究证实。
2.4.3 结直肠癌 Razak等[54]在2种结直肠癌HCT116和HT29细胞系中研究花旗松素的抗肿瘤活性，分别在给药24、48h后测得花旗松素的IC50分别为51.3、43.5 µmol/L（HCT116细胞）和66.1、43.5 µmol/L（HT29细胞）；花旗松素40、60 µmol/L对HCT116细胞和HT29细胞的细胞周期具有显著的阻滞作用，同时，花旗松素抑制体内外模型中β-连环蛋白（β-catenin）、Akt和存活蛋白的表达水平；HCT116移植模型证实花旗松素通过抑制细胞生长、促进细胞G2周期转化和增加细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。
Lee等[55]报道花旗松素在HCT 116细胞中表现出显著的诱导醌还原酶的活性，并具有低细胞毒性，在DNA微阵列技术的结果中，花旗松素60µmol/L上调65个基因，包括如NQO1、谷胱苷肽转硫酶1和硫氧还蛋白还原酶1等具有化学防御的II相酶。此外，花旗松素显著激活抗氧化反应元件，但不激活外源性反应元件。由此证实，花旗松素具有依赖抗氧化反应元件的化学防御作用机制进而抑制肿瘤活性。Manigandan等[56]在研究中发现，花旗松素可干预1,2-二甲基肼诱导的小鼠炎症和Wnt/β-catenin级联反应导致的结肠癌反应，并降低血清癌胚抗原和乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase，LDH）水平，减少肥大细胞的增殖，提高Nrf2蛋白表达，同时抑制NF-κB和Wnt信号的表达，下调TNF-α、COX-2、β-catenin和周期蛋白D1的表达，此外，在虚拟对接中也显示出花旗松素与Nrf2、β-catenin、TNF-α有较强的结合力，提示花旗松素能通过上调Nrf2通路调控Wnt/β-catenin通路进而抑制肿瘤细胞增殖和分化，达到抗结肠癌的作用。
2.4.4 前列腺癌 花旗松素联合使用穿心莲内酯能通过破坏前列腺肿瘤细胞有丝分裂中的微管动力并激活纺锤体检查点，显著提高抗癌活性[57]。
2.4.5 骨癌和骨肉瘤 2014年，研究者发现花旗松素对尤文氏肉瘤细胞系具有抑制作用。研究人员使用编码EWS（尤文氏肉瘤的恶性特征之一）的shRNA质粒和花旗松素一起给予人神经上皮瘤SK-N-MC细胞和人尤文氏肉瘤RD-ES细胞，在给药后抑制了80%的细胞活力，2种细胞的迁移率明显下降，通过减少p53启动子的DNA甲基化和上调p53、p53上调促凋亡因子和佛波醇-12-豆蔻酸-13-乙酸酯诱导蛋白1的表达降低EWS的表达水平，此外，在尤文氏肉瘤移植裸鼠模型中，EWS shRNA联合花旗松素可抑制尤文氏肉瘤的生长分化、血管生成并降低侵袭性因子的表达，并诱导Caspase-3的激活促进肿瘤细胞凋亡[58]。另外，在荷骨肉瘤U20S细胞系模型小鼠体内ip花旗松素25mg/kg后，可显著抑制肿瘤的生长，在体外U20S和骨肉瘤Saos-2细胞系中，花旗松素可加快2种细胞G1期阻滞和细胞凋亡，降低Akt及磷酸化的Akt（p-Ser473）、细胞S期激酶相关蛋白2、原癌基因c-myc的表达水平[59]。
2.4.6 其他 另有体外细胞研究报道花旗松素表现出了良好的抗宫颈癌、胃癌和肝癌活性[60-62]。花旗松素对联苯胺诱导的癌突变表现出抑制作用，还可抑制联苯胺和铁介导的脂质过氧化反应，花旗松素通过激活酶如P450酶、过氧化物酶及P450酶和铁螯合的产物发挥抗突变作用[63]。热休克蛋白90（heat shockprotein 90，HSP90）可在肿瘤细胞形成时维持超过200个突变的或过表达的致癌蛋白，细胞分裂蛋白是一种HSP90的协同伴侣分子，作为适配器将蛋白激酶加载到HSP90上，形成复合物促进蛋白激酶的成熟及表达[64]。而花旗松素会结合在此复合物的交界处，破坏这2种蛋白残基的结合，发挥抗肿瘤效果[65]。
花旗松素通过多效应的作用靶点和信号通路，对多种癌细胞的细胞周期、氧化反应及炎性细胞因子等产生显著的抑制作用，表明花旗松素具有抗癌作用。
2.5 调血脂和抗血管形成
研究证明，黄酮类成分可通过阻止羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（hydroxy methylglutaryl coenzymeA，HMG-CoA）的活性或通过影响载脂蛋白的比例限制TG的产生，具有潜在的调血脂作用[66]。体内研究证实花旗松素可降低肝脏中总胆固醇水平、减少血清和肝脏中TBARS的浓度，但对血清和肝脏抗氧化酶活性无影响[67]。载脂蛋白载脂蛋白（apolipoprotein，apo）B和apoA-I分别作为低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）受体的配体，apoB将胆固醇运送到组织中，而apoA-I可将胆固醇从组织中外排到肝脏中，促进排泄，因此，可用apoB/apoA-I的值来衡量心血管疾病。花旗松素200 mmol/L预给药HepG2细胞24 h可抑制86%胆固醇的合成，同时，抑制HMG-CoA还原酶的活性、胆固醇的酯化、TG及磷脂的合成，增加36% apoA-I及减少61% apoB的分泌量[68]。Casaschi等[69]通过另一项研究证实，同样浓度的花旗松素可使HepG2细胞减少63% apoB，同时减少37%微体TG水平，其中二酰基甘油酰基转移酶（diacylglycerol acyltransferase，DGAT）的活性降低了35%，微粒体TG转移蛋白（triglyceride transfer protein，MTP）活性降低了41%，表明花旗松素通过降低DGAT和MTP活性减少apoB的分泌进而限制TG的合成。
顾媛媛等[70]发现花旗松素通过减轻氧化应激反应和心肌组织病理状态对异丙肾上腺素建立的急性心肌缺血模型大鼠具有保护作用。最近另一研究表明，花旗松素通过PI3K/Akt通路抑制氧化应激和内质网应激诱导的细胞凋亡，从而显示出保护心脏的作用。在这项研究中，花旗松素能明显减轻心肌缺血再灌注损伤大鼠离体心脏的功能障碍，清除自由基，降低脂质过氧化，并提高体内外抗氧化酶活性，抑制凋亡通路及促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白（C/EBP-homologousprotein，CHOP）、Caspase-12和p-c-Jun氨基端激酶（c-jun N-terminal kinase，JNK）的表达，通过增加HO-1的表达、Nrf2与抗氧化反应元件的结合降低葡萄糖调节蛋白（glucose-regulatedprotein，GRP）78、p-蛋白激酶R样内质网激酶（p-protein kinase R like ERkinase，p-PERK）和p-真核起始因子2α（p-eukaryoticinitiation factor 2α，p-eif2α）的表达水平延缓内质网应激反应[71]。另有研究者使用H2O2诱导心肌H9c2细胞损伤模型研究花旗松素的抗氧化能力，结果表明不同时间和浓度的花旗松素预处理细胞后，均能提高细胞的存活率、减少有害物质产生及增加过氧化物酶的活性[72]。数据表明花旗松素虽然通过不同的途径对心肌损伤起保护和改善作用，但其抗氧化和抗炎作用显然是抗心血管损伤的重要作用基础。
花旗松素还能抑制人脐静脉内皮细胞基质的形成。在鸡尿囊绒膜试验中，花旗松素抑制新生血管和血管分支的产生，表明花旗松素具有显著的抗血管生成的作用[73]。
2.6 抗老年痴呆
花旗松素具有抗阿尔茨海默症作用。β位点淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1（beta-site APP cleaving enzyme 1，BACE1）是一种限速酶，主要负责将淀粉样前体蛋白裂解为Aβ肽。花旗松素10 µmol/L单独或联合使用西洛他唑能显著降低小鼠脑神经瘤N2a-Swe细胞中上调表达的p-酪氨酸激酶（Janus Kinase，JAK）、p-信号转导与转录激活因子3（signal transducer and activator oftranscription 3，STAT3）及BACE1的表达水平，细胞溶质中NF-κB抑制蛋白α（inhibitor-α of nuclear transcription factor-κB，IκBα）的表达含量升高，细胞核中的NF-κB p65和细胞核NF-κB p65 DNA结合活性也表现出显著的降低趋势；在小胶质BV-2细胞中，花旗松素和西洛他唑能显著降低LPS诱导的iNOS和COX-2的表达，减少亚硝酸盐的产生[74]。
Saito等[75]发现在脑淀粉样血管病中，花旗松素抑制淀粉样低聚物的形成并恢复血管完整性和记忆，改善Tg-SwDl小鼠减少的脑血流量和脑血管反应性；体外实验结果发现，花旗松素可有效抑制淀粉样蛋白β1-40的组装，显著降低Tg-SwDI小鼠脑组织中的淀粉β寡聚体水平。最近，Saito及其团队又发现花旗松素可通过抑制apoE-细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal regulated kinase 1/2，ERK1/2）-淀粉样蛋白β前体蛋白轴的功能，阻止小鼠脑内淀粉样蛋白β的产生，减少脑内髓细胞触发受体2（triggeringreceptor expressed on myeloid cell 2，TREM2）上触发受体的累积，降低脑内活跃的Caspase水平，减少细胞凋亡。该团队系统地阐述花旗松素具有改善脑淀粉样血管病的作用和神经保护作用[76]。此外，花旗松素还可抑制Aβ42原纤维的聚集，与花旗松素B环上的3′、4′位酚羟基有着密切相关性，结果表明花旗松素可抑制Aβ42原纤维形成的伸长阶段但不影响成核阶段[77]。
2.7 抗菌和抗寄生虫
Kuspradin等[78]发现花旗松素能抑制远缘链球菌Streptococcus sobrinus（一种牙科病原体）的增殖和葡萄糖转移酶的产生。DNA回旋酶和氨酰tRNA合成酶是细菌参与DNA复制、转录和翻译的2种必需的酶类物质。分子动力学模拟结果表明花旗松素抗结核的最低质量浓度为≤12.5µg/mL[79]，提示花旗松素较低浓度即可抑制结核杆菌的活力。傅若秋等[80]发现9种中药单体可以抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用，其中花旗松素作用最强，花旗松素质量浓度达到400 µg/mL以上会显著杀伤该菌株。
花旗松素与乙胺嘧啶联用对弓形虫速殖子有明显的抑制作用，IC50为1.39 µg/mL；花旗松素与乙胺嘧啶联用在被感染的人包皮成纤维HFF细胞和人胚肾HEK293细胞上无细胞毒性[81]，提示花旗松素与化学药联用在抗菌减毒增效方面有进一步研发的价值。
3 结语
花旗松素具有多方面的抗氧化功能，这些功能的发挥得益于花旗松素结构的特性，5,7,3′,4′-ArOH和B环3-OH的存在可以增加电子密度的离域性，提供更强清除ROS的活性。低聚物甚至多聚物的形成也是含多酚结构的黄酮类成分在存储过程中产生的特有产物，在活性方面的增强或变化可能会成为今后研究的重点和开发新抗氧化剂的路径。氧化应激和炎症反应往往在疾病发生时最先表现出来，花旗松素通过多机制和多靶点途径发挥抗氧化和抗炎作用可能是其抗肿瘤、保肝、心血管保护等作用的基础。花旗松素对皮肤癌细胞和非癌细胞的选择性作用模式显示出成药最基本的安全性要求，联合化学药抗病原微生物的结果，提示基于花旗松素的低毒性，可在未来考虑联合用药达到增效减毒的作用。结合已有的研究，笔者对于花旗松素新的适应证进行了一定的研究，研究发现花旗松素可以治疗佐剂型关节炎大鼠，提示花旗松素对类风湿性关节炎这一自身免疫性疾病有着相应的改善能力。尽管越来越多的数据表明花旗松素具有多样化的药理活性，但在临床上应用花旗松素治疗疾病，还有很长的科研和探索之路要走。