背景[1-3]
5羟色胺抗体是一类可以特异性结合5羟色胺的多克隆抗体,主要用于体外检测5羟色胺的WB、Elisa、IP、IF、IHC等免疫学实验。
5-羟色胺是一种吲哚衍生物,最早是从血清中发现的,又名血清素,广泛存在于哺乳动物组织中,特别在大脑皮层质及神经突触内含量很高,它也是一种抑制性神经递质。
5-羟色胺能与酸作用生成结晶盐。5-羟色胺在脑组织中的浓度较高,它是调节神经活动的一种重要物质。有些机体组织当受到某些药物作用时,可以释放出5-羟色胺,例如一个利血平分子可以使受作用的组织释放出几百个5-羟色胺分子,因而产生利血平的一系列生理作用。

5羟色胺抗体免疫组化
作为自体活性物质,约90%合成和分布于肠嗜铬细胞,通常与ATP等物质一起储存于细胞颗粒内。在刺激因素作用下,5-HT从颗粒内释放、弥散到血液,并被血小板摄取和储存,储存量约占全身的8%。5-HT作为神经递质,主要分布于松果体和下丘脑,可能参与痛觉、睡眠和体温等生理功能的调节。中枢神经系统5-HT含量及功能异常可能与精神病和偏头痛等多种疾病的发病有关。
5-HT必须通过相应受体的介导才能产生作用。5-HT受体分型复杂,已发现7种5-HT受体亚型。5-HT通过激动不同的5-HT受体亚型,可具有不同的药理作用,但5-HT本身尚无临床应用价值。
利用电子方式重复经颅磁刺激(rTMS),刺激频率在1Hz(每秒1次),会使得额叶皮质多巴胺功能降低,纹状体和海马处多巴胺功能升高,降低额叶皮质5羟色胺(5-HT)2受体,增加额叶和扣带回皮质的5-HT1A受体,可以认为改变羟色胺受体分泌。
本身为一类抗抑郁药,动物实验表明5-羟色胺的缺乏与酒精依赖的形成有关,SSRls可以增加突触间隙、5-羟色胺的浓度,从而减少患者对酒的渴求程度,减少饮酒量。常用的有西酞普兰、氟西汀、帕罗西汀,舍曲林等。其用量一般要高于抗抑郁用量。当酒依赖患者合并抑郁症状时,SSRls的疗效更明显,因为研究显示,抑郁症状可增加对酒的渴求。临床研究证实,氟西汀可改善重度抑郁症状,同时还可减少饮酒量和增加戒酒时间。
应用[4][5]
用于5—羟色胺调控肉鸡脂肪代谢的途径研究
从动物和细胞两种模型来探讨鸡5-HT的功能、合成以及影响其合成的因素,初步阐明了鸡5-HT参与机体脂肪代谢的途径。(1)肉鸡5-HT受体的基因表达。选取正常饲养的肉鸡研究了5-HT受体在不同生长阶段(21 d和35 d)和不同组织器官(腹脂、下丘脑、肝脏、胸肌、腿肌、脾脏、胸腺、法氏囊、十二指肠、空肠和盲肠)的表达。试验结果显示,5-HT受体5-HT2A在腹脂组织中表达量最高,其次是在下丘脑、腿肌、脾脏、肝脏和胸肌,在空肠、十二指肠、回肠、胸腺和法氏囊表达量最低。5-HT在不同组织中的相对表达水平在21d和35d结果相似,提示肉鸡不同生长阶段不影响其表达结果。结果提示,在肉鸡体内5-HT可能参与脂肪代谢调控。
(2)日粮添加色氨酸对肉鸡免疫因子和5-HT合成的影响。应用5-HT的前体物色氨酸(Trp)研究对肉鸡免疫因子和5-HT合成的影响。7 d时,挑选体重相近的肉鸡200只,分别给予添加1%Trp的日粮(处理组)和正常日粮(对照组)饲喂,试验持续3周。结果显示,Trp日粮处理显著降低肉鸡体增重、采食量和腹脂重,上调肝脏、十二指肠、空肠和回肠中5-HT合成限速酶色氨酸羟化酶(TPH1)的基因水平,下调空肠中白介素(IL)-10,回肠中IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的基因水平(p<0.05)。结果表明,日粮添加Trp能够增加体内5-HT的合成,并抑制肠道免疫因子的表达。
(3)日粮添加5-羟色氨酸对肉鸡脂肪代谢和免疫因子的影响。试验对7 d的肉鸡给予0.2%的5-HT前体物质5-羟色氨酸(5-HTP)处理,处理3周后分析了对肉鸡脂肪代谢和免疫因子表达的影响。结果显示,5-HTP处理能够显著减少肉鸡腹脂的沉积(p<0.05),对肝脏和腹脂脂肪代谢相关基因分析结果发现仅观测到脂联素(ADP)1R和ADP2R基因水平有差异(p<0.05),其他未见显著变化。与对照组相比,5-HTP处理上调肝脏、十二指肠和回肠的TPH1基因水平,下调十二指肠IL-1β,IL-10和TNF-α,空肠IL-10以及回肠TNF-α的转录水平(p<0.05)。结果表明,肉鸡给予5-HTP处理能够增加体内5-HT的合成,抑制肠道免疫因子的表达,同时改变了机体脂肪代谢。
(4)5-HT调控肝细胞内脂肪代谢。挑选18胚龄的SPF鸡胚,用于离体培养肝细胞,并用10μM 5-HT给予处理,观察对脂肪代谢的影响。5-HT处理肝细胞显著减少胞内甘油三酯(TG)的沉积(p<0.05),油红O染色结果与其一致。对AMPK信号通路检测结果发现5-HT处理并未影响单磷酸腺苷激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)/肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)/固醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1的蛋白水平。基因水平检测,5-HT处理下调脂肪酸合成酶(FAS),ACC,SREBP-1,CPT1,脂肪酸结合蛋白4(FABP4),脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和转录因子CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α的表达,上调脂蛋白酯酶(LPL)和5-HT2A的转录水平(p<0.05)。同时发现,相比于对照组,5-HT处理能够显著减少肝细胞内FAS和苹果酸酶(ME)的活性,增加肝脂酶(HL)活性,抑制了葡萄糖摄取和脂肪酸摄取(p<0.05)。表明5-HT在肝细胞内对TG沉积的抑制是由于脂肪合成减少,分解增加,与氧化利用无关。
参考文献
[1]Short communication:Supplementation of colostrum and milk with 5-hydroxy-l-tryptophan affects immune factors but not growth performance in newborn calves[J].Lorenzo E.Hernández-Castellano,Ranya?z?elik,Laura L.Hernandez,Rupert M.Bruckmaier.Journal of Dairy Science.2018(1)
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[5]王慧.5—羟色胺调控肉鸡脂肪代谢的途径[D].山东农业大学,2020.