背景及概述[1][2]
雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)为卫矛科雷公藤属植物，临床上已广 泛用于治疗类风湿性关节炎、肾病综合征、系统性红斑狼疮等多种自身免疫疾病，其见效快、疗效确切，几乎没有可以完全替代的类似中药。雷公藤内酯酮(Triptonide)，又叫雷公藤羰内酯、雷公藤酮，是从雷公藤中分离得到的一个二萜类化合物，是雷公藤的有效成份之一，它与雷公藤内酯醇结构相似，活性也相当，其结构式如下。雷公藤内酯酮具有抗雄性生育作用和对免疫功能具有一定的影响。
制备[1] [3]
一、利用离子液体高效提取雷公藤内酯酮的方法，其特征在于包括以下步骤：
1）超声强化提取：含雷公藤内酯酮的植物原料经干燥粉碎后过40~80目筛，按固液比1： 5~50加入体积比为10：0.1~0.8：2~10的乙醇、水和咪唑类离子液体Ⅰ混合液，于超声功率密度10~200W/cm2及超声频率10~100kHz下，20~65 ℃条件下超声提取5~60 min，固液分离后得含雷公藤内酯酮的提取液；
2）有机溶剂萃取：将脂肪族羧酸酯和一定量的水加入到所述步骤1）得到的提取液中，按提取液、水与脂肪族羧酸酯的体积比1~5：1~3：1，萃取1~5次。分离有机相得雷公藤内酯酮萃取相，然后将有机相在40~60℃下减压浓缩至近干，得到含有雷公藤内酯酮的浸膏。萃取余液可循环使用，该萃取余液的主要成份为上述咪唑类离子液体Ⅰ；
3）柱层析净化：将得到的含有雷公藤内酯酮的浸膏与硅胶（200~300目）按重量比1：10~100进行充分混合后装入一支底部具有筛板的玻璃层析柱中，先用适量乙醚淋洗，再用体积比为4：1的乙醚与乙酸乙酯混合溶剂洗脱，控制洗脱液流速不大于10 mL/min，收集洗脱液， 然后将其在40~60℃下减压浓缩至近干，得到雷公藤内酯酮粗品；
4）HSCCC分离纯化：选择HSCCC溶剂体系，按体积/重量比0.2~2：1 (mL/mg）将HSCCC溶剂体系和上述雷公藤内酯酮的粗品加入到分液漏斗中，震荡、静置分层、平衡后，将上、下相分开，以溶剂体系的上相为固定相，溶剂体系的下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，根据检测器显示的谱图分步收集目标物，获得含雷公藤内酯酮的溶液；
5）真空冷冻干燥：在适当温度、压力下，将上述雷公藤内酯酮溶液进行真空冷冻干燥，并回收有机萃取剂，得到纯度大于95%的雷公藤内酯酮。
与现有技术相比，本发明的优点在于：采用了按一定比例混合而成的乙醇、水和咪唑类离子液体Ⅰ混合溶液作为提取液，同时结合超声辅助技术在含有雷公藤内酯酮的植物原料中提取雷公藤内酯酮，该提取液与纯有机溶剂提取液相比，大大节约了有机溶剂的使用量，绿色、环保、经济，降低了挥发性有机溶剂对环境及实验人员带来的污染和危害，同时由于添加了离子液体，大大改善了提取效果，提高了提取效率。进一步，本发明在HSCCC流动相中添加了功能化离子液体，明显缩短了HSCCC的分离时间，显著提高了分离效率，得到的雷公藤内酯酮的纯度大于95%，而且在环境友好性和人体安全性方面更具优势。图1为HSCCC的雷公藤内酯酮的紫外色谱图。
二、合成方法如下：取雷公藤内酯醇若干，以有机溶剂溶解后，在辅助试剂的存在下，加入一定量的氧化剂，在反应后，经有机溶剂稀释，以NaOH，HCl或/和饱和NaHCO3及水洗涤后，以无水Na2SO4干燥后浓缩，再用有机溶剂重结晶或硅胶柱层析分离，得雷公藤内酯酮。上述合成反应式为：
取29.4mg重铬酸钾，加1ml水溶解，加入0.05ml含39mgH2SO4的水溶液，搅拌状态下滴加3ml雷公藤内酯醇（36mg）的CH2Cl2（或CHCl3）溶液，回流状态下搅拌24时，放置一段时间后，出CH2Cl2层，水层再分别回3mlCH2Cl2洗涤两次，合并有机提提液，先以饱和NaHCO3洗涤，再以水洗涤后，经无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅酸柱层析分离，乙醚为洗脱剂，所得雷公藤内酯酮的流份浓缩后，以二氧甲烷-石油醚复合溶剂重结晶，得雷公藤内酯酮。
药理作用[2]
雷公藤内酯酮可以降低胃癌细胞中促癌的非编码RNA的表达，使其恶性行为受到显著抑制，在胃癌的治疗上具有良好的应用价值。雷公藤内酯酮可以通过抑制Gli1、Gli2基因表达显著抑制肝癌细胞的增殖，且抑制作用呈现明显的剂量依赖性，雷公藤内酯酮为Gli1、Gli2基因的有效抑制剂，可以用于制备防治肝癌的药物。同时，由于雷公藤内酯酮为Gli1、Gli2基因表达的有效抑制剂，雷公藤内酯酮也可以用于制备治疗Gli1、Gli2基因高表达相关的疾病的药物。
应用 [4]
CN201810928553.1提供雷公藤内酯酮的用途，即雷公藤内酯酮在制药中的应用。具体地，本发明提供雷公藤内酯酮作为制备食蟹猴避孕节育药物中的应用。
雷公藤提取物中雷公藤总甙、雷公藤多甙、雷公藤内酯醇具有良好的避孕效应，但同时可产生免疫抑制效应，影响其进一步应用。雷公藤中的一种单体——雷公藤内酯酮(SD-1)，本发明人研究发现8-9岁雄性食蟹猴口服0.1mg/kg的剂量雷公藤内酯酮具有良好避孕效应，且没有明显的副作用，显示出良好的应用前景。
(1)非激素男性避孕药SD-1在食蟹猴中有很好的避孕效果：雄性成年食蟹猴在服用剂量0.1mg/kg SD-1第5周，食蟹猴精子几乎100％发生变形、死亡。目前最长服药时间已达480多天，其长期避孕效果也很好。
(2)SD-1有效剂量低：食蟹猴以0.1mg/kg剂量服药，其精子在服药第5周时几乎100％发生严重变形、死亡。
(3)SD-1避孕是可逆的：4只食蟹猴服药后精子几乎100％变形、死亡后，停药5周左右，精子基本恢复正常，表明SD-1的避孕是可逆性的。
(4)SD-1是安全的避孕药：SD-1没有明显的毒副作用，食蟹猴服药期间血液常规、生化、肝功能、激素、免疫功能均没有显著变化，是安全有效剂量。
主要参考资料
[1] CN201710801645.9 利用离子液体超声提取雷公藤内酯酮的方法
[2] CN201810109778.4 雷公藤内酯酮用于制备Gli基因抑制剂和防治肝癌药物的生物医药用途
[3] CN91108268.9 雷公藤内酯酮的合成方法
[4] CN201810928553.1 雷公藤内酯酮在制备食蟹猴避孕节育药物中的应用